无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒

【技术保护点】
1.一种实时荧光定量PCR检测EB病毒C/D基因基因分型试剂盒，其特征在于，由定量PCR反应液(1)、C型标准品(2)、D型标准品(3)、阳性对照品(4)、阴性对照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作说明书(7)、盒体(8)、盒盖(9)组成，其中定量PCR反应液(1)含有PCR缓冲液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型荧光探针、D型荧光探针、Taq DNA聚合酶，上游引物序列为:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’，下游引物序列为：5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型荧光探针为：5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’，D型荧光探针为：5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
 

产品名称	无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称	Achromobacter spp.
编号	EY00P3633

无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒运输及保存低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。

产品及特点:
无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒从土壤农杆菌 CP4 菌株中分离得到的抗除草剂草甘膦基因，是转基因植物研究中最为常用的一种筛选标记基因，因此本公司根据探针法 qPCR 原理开发了专门用于检测无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒的试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。
2. 根据无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分，但不能检测其他非无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒成分。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。
6. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的探针法荧光定量 PCR。

荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
技术原理：
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
以下是公司正在促销打折产品：
21(S)-羟基孟鲁司特  现货供应  21(S)-Hydroxy Moelukast
21(R)-羟基孟鲁司特  现货供应  21(R)-Hydroxy Moelukast
2′-脱氧胞苷 盐盐  现货供应  2′-Deoxycytidine hydrochloride
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2’-酰基毛蕊花糖苷(标准品)  现货供应  2'-Acetylacteoside
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2’-脱氧胞苷-5‘-磷二钠盐  现货供应  dCMP,2Na
2‘-脱氧尿苷  现货供应  2'-Deoxyuridine
2‘-脱氧胞苷(标准品)  现货供应  2'-Deoxycytidine;2'-dC
2‘-脱氧胞苷  现货供应  2'-Deoxycytidine;2'-dC
2ˊ,7ˊ-二荧光素钠盐  现货供应  2',7'-Dichlorofluorescein Sodium Salt
2-[2-(2-t-Boc-氨基氧基)氧基]醇  现货供应  2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol
2.4-二羟基-6-基-烟酯  现货供应  Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate
2,9-二-1,10-菲罗啉(>97.0%(GC)(T))  现货供应  2,9-Dichloro-1,10-phenahroline
2,9-二基-1,10-邻二杂菲(>96.0%(HPLC))  现货供应  2,9-Dibutyl-1,10-phenahroline
2,9-二基-1,10-菲咯啉(>98.0%(HPLC)(T))  现货供应  2,9-Diphenyl-1,10-phenahroline
2,7-双(4,4,5,5-四基-1,3,2-二氧杂硼环-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))  现货供应  2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene
Keratin 5 Polyclonal Antibody　角蛋白5 抗体
Cytokeratin　角蛋白4 抗体
KRT37 Polyclonal Antibody　角蛋白37 抗体
KRT36 Polyclonal Antibody　角蛋白36 抗体
KRT35 Polyclonal Antibody　角蛋白35 抗体
KT33B Polyclonal Antibody　角蛋白33B 抗体
KT33A Polyclonal Antibody　角蛋白33A 抗体
K1H2 Polyclonal Antibody　角蛋白32 抗体
K1H1 Polyclonal Antibody　角蛋白31 抗体
K1C12 Polyclonal Antibody　角蛋白12 抗体
无色杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒西蒙氏枸橼酸盐琼脂     　用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
肠道菌计数琼脂 (VRBDA)     　用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别(MERCK方法)
菌种保存培养基   　用于常用细菌斜面传代及室温保存
乳糖蛋白胨培养液    　用于饮用水，水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)
Cary-Blair 氏运送培养基       　250用于运送肠道致病菌标本
哥伦比亚血琼脂基础　250营养非常丰富，用各种细菌的基础培养基(AFNOR EP IDF标准)
BPL琼脂BPL Agar用于食品中沙门氏菌选择性分离培养(Merck方法)
改良BPLS琼脂BPLS Agar，Modified用于各种标本中沙门氏菌选择性分离培养(ISO标准)
MIO培养基MIO Medium用于动力、吲哚和鸟氨酸试验(FDA方法)
XLT4琼脂XLT4 Agar用于食品中致病菌，特别是沙门氏菌分离培养(Merck方法)
Ｄ/E中和肉汤D/E Ｎeutralizing Broth用于卫生环境中微生物的分离培养(ACUMEDIA方法)