- ¥572 - 1021
- 康朗生物/KALANG
- KL1111N
- 中国
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
基因组DNA快速提取试剂盒
- 保质期：
保存2年
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次/100次
规格价格：50次/572.00元
规格价格：100次/1021.00元
产品组分
| 货号 |
KL1111 （50次） |
KL1112 （100次） |
| 消化缓冲液DS |
15 ml |
30 ml |
| 裂解液MS |
20 ml |
40 ml |
| 蛋白酶K（20mg/ml） |
1 ml |
2 ml |
| 去蛋白液PS |
30 ml |
60 ml |
| 漂洗液PE |
15 ml |
30 ml |
| 纯化液TE |
5 ml |
10 ml |
| DNA纯化柱 |
50个 |
100个 |
| 说明书 |
1份 |
1份 |
● 裂解液MS中含变性剂，请不要直接接触皮肤。
● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，
即含75%乙醇。
产品说明
本产品可用于昆虫、线虫、动物等样本的基因组DNA纯化。纯化原理是利用细胞裂解液裂解细胞核释放基因组DNA，由硅胶膜柱可逆吸附体系中的基因组DNA，经蛋白酶K消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质以及多糖等杂质，用纯化液洗脱获得基因组DNA。一次可从不超过10 mg组织材料中提取到3-35 μg的高纯度基因组DNA（OD260/OD280=1.7-1.9），此基因组DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验。
质量控制
纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷贝基因的PCR扩增鉴定。
保存条件
蛋白酶K室温运输，于-20℃保存，避免反复冻融。
其余试剂置于室温（15-25℃）干燥条件下保存1年。
如果消化缓冲液DS和MS中有沉淀，可在55℃加热溶解，待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA的纯化效率。
注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
● 漂洗液PE第一次使用前请按瓶上标签加入3倍体积的无水乙醇，即15 ml漂洗液PE加入45 ml无水乙醇，30 ml漂洗液PE加入90 ml无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。
● 消化缓冲液DS和裂解液MS室温保存可能会有沉淀产生，在55℃加热溶解，待恢复至室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA纯化效率。
● 应尽量使用新鲜的实验材料，确保提取的基因组DNA不被降解。不能立刻提取基因组DNA 的实验材料应尽快置于液氮或-80℃冰箱中保存并避免反复冻融。
● 使用液氮研磨组织材料时，应随时加入液氮，确保提取的基因组DNA不被降解。
● 基因组DNA需长期保存时，建议使用纯化液TE。用无菌的离心管分装后保存于-20℃或-80℃。
● 所有离心步骤均为室温下进行。
● 请严格按照操作步骤操作。
操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
1 取少量样本材料，放入液氮预冷的研钵中。快速用力研磨的同时加入少量液氮，直至样本材料被研磨成粉末。将研磨好的样本转移至1.5 ml离心管中，每管组织材料含量应不超过10 mg。
● 如没有液氮，可用剪刀剪成小块，放入研钵或匀浆器中，加入适量TE（pH 8.0），处理成细胞悬液。将不超过10 mg当量的细胞悬液转移至一个新的1.5 ml的离心管中，12,000 rpm离心1min，弃上清，收集沉淀。
● 每只离心管中的样本当量不宜超过10 mg。每10 mg样本材料可获得10 μg基因组DNA。样本量过大，将会影响细胞核裂解效率并可能堵塞纯化柱，进而降低基因组DNA的得率与纯度。
2 加入200 μl消化缓冲液DS，涡旋振荡至形成完全均一的悬浮液。
● 如需去除RNA，可加入4 μl RNase A（100 mg/ml，N9042），振荡15秒，室温放置5min。
3 加入20 μl蛋白酶K，混匀，55℃水浴或金属浴，至组织完全溶解，通常需要1-3小时。对特别难溶解的组织如尾巴、昆虫可放置过夜。
4 加入220 μl裂解液MS，涡旋振荡混匀。65℃温浴10min。溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠，室温放置5min使溶液冷却。
● 加入裂解液MS时可能会产生白色沉淀，一般65℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
5 加入220 μl无水乙醇，上下颠倒混匀。此时可能出现絮状沉淀。简短离心以去除管盖内壁的水珠。将溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中。12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 若溶液体积大于纯化柱容积（700 μl），可分两次离心。
● 此时基因组DNA被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
6 加入500 μl去蛋白液PS，12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 此步骤的作用是去除硅胶膜上吸附的蛋白、脂质等杂质，以获得高质量基因组DNA。
7 加入500μl漂洗液PE，12,000 rpm离心1min，弃滤液。
● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，即含75%乙醇。
8 加入500 μl漂洗液PE，12,000 rpm离心1min，弃滤液。
9 12,000 rpm离心3min，以彻底去除纯化柱中残留的液体。
● 此步骤的作用是去除残留乙醇，避免影响后续的酶促反应（PCR或酶切）。同时利于基因组DNA充分溶解。
10 将纯化柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱中央处，悬空滴加30-100μl洗脱液TE。室温放置2min。
11 12,000 rpm离心2min，管底即为高纯度基因组DNA。-20℃保存。
● 洗脱液TE可用去离子水代替，但其pH需为8.0-8.5。
● 对洗脱液TE 65℃预热，会提高基因组DNA的产量。
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文献和实验♦ 适用范围：适用于快速提取植物组织细胞总RNA本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。♦ 储存事项：1. 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。2. 不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。3. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。♦ 产品介绍：独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭
粪便基因组DNA快速提取方法，无抑制物，可直接做PCR。采用硅胶膜技术从新鲜或冷冻人类粪便或其他样品类型（混有高浓度的PCR抑制剂）中抽提多至30μg 的基因组、细菌、病毒和寄生物DNA。独特的吸附树脂配合经优化的缓冲液可去除PCR抑制剂。方便的Aidlab 离心柱纯化过程只需40分钟，用于从粪便中纯化最多30μg 基因组、细菌、病毒和寄生虫DNA；快速纯化高品质，即用型DNA；无有机提取或乙醇沉淀；持续的高产量；彻底去除污染物和下游反应抑制物。纯化的DNA长度可达50 kb
适合从动物细胞、动物组织或酵母菌中同步纯化总RNA 和基因组DNA纯化的总RNA ，适合用于Northern Blot、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、S1 核酸酶作图、RNase 保护测定、制备mRNA 和构建cDNA 文库等各种RNA 分子生物学实验。纯化的基因组DNA 适用于PCR、Southern Blot、RAPD、AFLP、RFLP 等分子生物学实验。一、试剂盒组成、贮存、稳定性以每次从1×107 动物细胞、100mg 动物组织或5×107 酵母菌中
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