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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 检测方法:
紫外分光光度法
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
50管/48样
试剂盒名称:结合态淀粉合成酶(GBSS)测试盒
规格:50管/48样
保存:2-8℃ 测试方法:紫外分光光度法
应用领域:用于科学研究、教学、分析检测中。 用途:科研实验
测定意义
GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。
测定原理
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP+还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。
需自备的的仪器和用品
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
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文献和实验三、仪器和试剂 仪器 高压液相色谱仪 带紫外分光检测器、旋转蒸发器、高速离心机;小离心管:具塑料盖1.5~3.0mL塑料离心管(与高速离心机配套)、高纯氮气、恒温水浴锅、紫外分光光度计。 2.试剂 实验用水为蒸馏水。试剂不加说明为分析纯。 1.无水乙醚:重蒸,不含有过氧化物。 过氧化物检查方法:用5mL 乙醚加1mL 10%碘化钾溶液,振摇1min。如有过氧化物则放出游离碘,水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液,水层呈蓝色。 去除过氧化物的方法:瓶中放
基纤维素钠(内含0.1 mg/mL硫柳汞),其中1号试管为试剂空白,加入0.01 M,pH6.8磷酸钠缓冲液1 ml; 2号试管为酶样空白,什么也不加;3,4号试管为酶样平行样,各加入1 ml酶液,4支试管同时放入39℃水浴回旋震荡培养60 min。培养后4支试管立即加入3 mL DNS (3,5-一硝基水杨酸溶液),再在2号试管中加入1 ml预先制备好的酶液,用旋涡震荡仪混匀后在开水浴中煮沸5 min,取出后用水冷却5min。以1号试管为空白,在紫外分光光度计上560 nm处进行比色。以D-葡萄糖作为标样
分的峰面积,对照标准曲线计算其含量,各组分之和即为总发酵单位。 (2)紫外分光光度法(对于斜面培养物)( 于秀莲,何建勇,白秀峰. 阿维菌素产生菌的诱变育种. 沈阳药科大学学报, 第21卷第3期) 将适量的斜面培养物铲出置于离心管中,加入丙酮2 mL,浸泡后再加入乙酸乙酯2 mI ,在旋涡式混合器上震荡2 min,3 000 r/min离心10 min,所得萃取液在754紫外分光光度计波长244 nm下,以甲醇为对照,测定样品的光密度,根据预先制备的光密度一阿维菌素标准曲线,计算阿维菌素的效价
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