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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 英文名:
SABC Kit-FITC(Rabbit IgG)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 保存条件:
低温
- 规格:
100T-200T
英文名称:SABC Kit-FITC(Rabbit IgG)
产品规格:100T-200T
发货周期:1~3天
本试剂盒适合于一抗为兔来源的IgG的免疫组化实验,FITC荧光检测。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex,SABC大约可形成一百个左右的FITC和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的FITC将保证SABC具有很高的敏感性。
保存:-20℃,如经常使用,可将封闭液,稀释液和抗荧光衰减封片剂存放于2-8℃以方便使用。
操作步骤(以石蜡切片热修复为例):
微量试剂请离心后使用。
1.切片常规脱蜡至水。
2.可选步聚:
a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸钠缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10min后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。
b、酶消化,滴加消化液,37℃10min,PBS(pH7.2-7.4)洗涤2-3次。
c、跳过此步,直接进入下一步。
3.滴加5% BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 免洗。
4.用稀释液将一抗按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37℃ 孵育1h左右或20℃ 2h左右,也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2min(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间)。
5.根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃孵育30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗涤3次,每次2min。
6.根据使用量,用稀释液将SABC-FITC 浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml 稀释液加入10μl SABC-FITC浓缩液,混匀即成SABC-FITC工作液,此工作液4℃可保存一周)。滴加SABC-FITC工作液,20-37℃孵育30min(避光)。PBS(pH7.2-7.4)洗涤4次,每次5min。
7.滴加抗荧光衰减封片剂封片。荧光显微镜观察。
对于细胞爬片,固定后,PBS 漂洗两次,再用0.5% Trxiton X-100 室温孵育20min, PBS 漂洗两次,接上述第3步。
对于冰冻切片,固定后,PBS 漂洗两次,再接上述第2 步。
注意事项:
如果背景过高,在SABC 反应之后,用加有0.01%~0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后封片观察。使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
3. 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
4.培养结束后,每孔加入20微升MTT溶液,在细胞培养箱内继续孵育3-6小时;
5.孵育结束后,每孔加入100微升Formanzan溶解液,在37℃细胞培养箱内再继续孵育,直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右,紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多,溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片, 560-600nm范围的滤光片均可使用。
免疫组化荧光检测试剂盒(兔源一抗) 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
ADD1 (Phospho-Ser726) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
YWHAZ (Phospho-Ser58) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
MAP3K5 (Phospho-Ser966) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:WB; IHC包装:100 ul
PLCG2 (Phospho-Tyr753) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IF 包装:100 ul
PRKCQ (Phospho-Ser695) polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:WB; IHC包装:100 ul
PRKCB (Phospho-Thr641) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
RELA (Phospho-Thr505) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
HSPB1 (Phospho-Ser15) polyclonal antibody反应物种:Human测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
MAP2K1 (Phospho-Ser221) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
VASP (Phospho-Ser239) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
PAK1 (Phospho-Thr212) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
SRC (Phospho-Tyr529) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
NFKBIA (Phospho-Ser32/Ser36) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse测试范围:WB; IHC; IF 包装:100 ul
JAK1 (Phospho-Tyr1022) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB; IHC包装:100 ul
LCK (Phospho-Tyr394) polyclonal antibody反应物种:Human; Mouse; Rat测试范围:WB 包装:100 ul
3-Oxours-12-en-28-oic acid盐酸坦洛新(标准品) 分子式:C15H22O2 性状:Oil 纯度:97.0%
Protostemotinine托芬那酸(标准品) 分子式:C15H22 性状:Liquid 纯度:98.0%
Brucein D甲钴胺(标准品) 分子式:C15H22O3 性状:Oil 纯度:95.0%
Xanthophyll单白前苷B 分子式:C15H22O2 性状:Oil 纯度:98.0%
6-Hydroxyindole单硝酸异山梨酯 分子式:C26H36O5 性状:Powder 纯度:98.0%
Taraxeryl acetate单硝酸异山梨酯 分子式:C23H30O5 性状:Powder 纯度:97.5%
Oxoglaucine2-单硝酸异山梨酯(标准品) 分子式:C29H41NO6 性状:Powder 纯度:98.0%
Laurocapram依那普利双酮(标准品) 分子式:C30H43NO6 性状:Powder 纯度:97.0%
Nodakenin依那普利拉(标准品) 分子式:C33H41NO6 性状:Powder 纯度:98.0%
免疫组化荧光检测试剂盒(兔源一抗) 中文名称 酪氨酸磷酸酶α抗体
别 名 HEPTP; HLPR; HPTP alpha; HPTPA; HPTPalpha; Leukocyte common antigen related peptide; LRP; Protein tyrosine phosphatase alpha; Protein tyrosine phosphatase receptor type A; Protein tyrosine phosphatase receptor type alpha polypeptide; Protein tyrosine phosphate; Protein-tyrosine phosphatase alpha; PTPA; PTPalpha; PTPase alpha; PTPLCA related phosphatase; PTPRA; PTPRA_HUMAN; PTPRL 2; PTPRL2; PTRA; R PTP alpha; R-PTP-alpha; Receptor type tyrosine protein phosphatase alpha; Receptor-type tyrosine-protein phosphatase alpha; RPTPA; Tyrosine phosphatase alpha.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 免疫学 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 89kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PTPRA
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
保存条件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
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文献和实验的话就只能现试试了。 国内好像有公司卖你所需要的抗体,可以检索下查查看! baisuilan 只要不是直接标记一抗,利用二抗带荧光或者酶,那就可以。 免疫荧光和免疫组化差不多,二抗带的标记不一样而已。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
。市面上可提供一些商品化的预先设计、优化的抗体组合试剂盒。这些试剂盒通过提供识别关键免疫和/或肿瘤细胞标志物的优化一抗组合,为新用户提供了构建多重荧光免疫组化抗体组合的简便途径。而开放渠道使研究人员能够灵活地添加他们自由选择的其他标志物。 b 选择抗体 与免疫学家和疾病专家合作,确定理想的一系列生物标志物可以回答手头的生物学问题。哪些标志物可以明确区分靶细胞表型与周围组织?是否有特定的标志物,其空间分布对于研究是否很重要?相关生物学问题是否涉及标志物的共定位和/或复杂细胞表型的相互
superman211 拟通过WB进行AP-1的相关研究,在选择一抗时遇到如下困惑,望了解的战友予以解答。关于AP-1的出c-jun的一抗有多种,其中主要分为磷酸化一抗、非磷酸化一抗两大类。每一大类又包含若干,不知如何选择,它们之间有何区别?实验目的为研究某细胞AP-1的表达情况,及其蛋白磷酸化和DNA结合活性等。 superman211 自顶,望解答,谢谢! ziyunfei ampk细胞
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