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CCK8 CCK-8试剂盒 (
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Cell Counting Kit-8
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有效期1年
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
4℃干燥避光保存,有效期一年,-20℃干燥避光保存,有效期二年
100 T
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
促销价(元)
CCK-8试剂盒Cell Counting Kit(CCK8)
40203ES60
100T
/
40203ES76
500T
480.00
452.00
40203ES80
1000T
920.00
872.00
40203ES88
3×1000T
1833.00
1582.00
40203ES92
10×1000T
5122.00
4852.00
3-6个复孔。3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)二. 细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液(100 μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养一段时间(37℃,5% CO2)。2、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。4、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。5、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。三. 细胞增殖-毒性检测1、在96孔板中配制100 μL的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。2、向培养板加入10 μL不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。4、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。 活力计算 细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力 注意事项 1)建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。2)有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK-8试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD值读数。3)白细胞可能需要培养较长时间。4)当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μL 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μL 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。5)如果没有450 nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片,但是450 nm滤光片的检测灵敏度最高。6)培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。7)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。HB230302
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