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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cell lysis buffer for Western and IP
- 库存:
709
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售Western及IP细胞裂解液优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Western及IP细胞裂解液优惠促销
产地:国产|进口
英文名:Cell lysis buffer for Western and IP
规格:100ml
品牌:百奥莱博
本品是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用百奥莱博的BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT036,YT037)测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
关于Western及IP细胞裂解液优惠促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·HDAC1抗体
编号:YT790
英文名称:anti-HDAC1 antibody
规格:>20次
本抗体是用表达纯化的小鼠HDAC1 aa53-482一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本HDAC1抗体识别的是总HDAC1(total HDAC1),可以检测内源性的HDAC1,未发现和其它HDAC蛋白有交叉反应。
染色质由重复的核小体(necliosome)构成,而核小体则包含了由Histone H2A,H2B,H3和H4各两个分子组成的八聚体和与该八聚体结合的DNA。组蛋白(histone)上的一些Lys位点,可以被乙酰化修饰,从而影响染色质的空间结构,最终影响该区域的基因转录调控。通常当组蛋白被乙酰化时,染色质处于相对松散的构象,此时转录因子可以结合到该区域促进相关基因的转录。反之,当组蛋白被去乙酰化时,染色质结构会变得相对致密,该区域相关基因的转录就会被抑制。组蛋白可以被多种乙酰化酶乙酰化,包括PCAF,p300/CBP,GCN5,SRC-1,TAFII250,BRCA-2和Patt1等。组蛋白去乙酰化酶包括HDAC(histone deacetylase)家族和Sirtuin家族(Sirt家族)。HDAC家族包括HDAC1,HDAC2,HDAC3,HDAC4,HDAC5,HDAC6,HDAC7,HDAC8,HDAC9,HDAC10和HDAC11。通常HDAC可以去乙酰化染色质中某些特定区域的组蛋白,导致该区域的染色质结构变得相对紧密,从而抑制该区域相关基因的表达。Class I HDAC包括HDAC1,2,3,8;Class II HDAC包括HDAC4,5,6,7,9,10。Sirtuin家族被称为Class III HDAC。Class IV HDAC只包括HDAC11。HDAC1,2,8主要定位在细胞核;而HDAC3则在细胞核和细胞浆都有分布,并且分布在膜结构上。Class II HDAC在特定条件下可以在细胞核和细胞浆之间穿梭(shuttle in and out)。HDAC在命名时被称为组蛋白去乙酰化酶,但事实上它们可以去乙酰化多种多样的蛋白。例如,HDAC6可以和微管(microtuble)结合,可以去乙酰化tubulin,Hsp90和cortactin等。目前发现大量的蛋白可以被乙酰化修饰,因此HDAC等乙酰化修饰酶被认为在基因转录调控、信号转导、生长发育、分化凋亡、代谢性疾病和肿瘤等多种生理病理过程中发挥重要作用。HDAC的抑制剂目前被认为是很有前景的肿瘤治疗药物。
产品组份:
HDAC1抗体————40μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:小鼠
免疫原:表达纯化的小鼠HDAC1 aa53-482一段多肽
宿主:兔
用途:WB,IP,IC
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG
HDAC1分子量:~65kD
推荐稀释比例:WB(1:500),IP(1:50),IC(1:100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
Western及IP细胞裂解液优惠促销关键词:YT038,Western及IP细胞裂解液,Cell lysis buffer for Western and IP
003001 兔血浆
噻苯咪唑 BHA 148-79-8
SJ0807 D-山梨糖
ARB10924 人芳香烃受体(AhR)酶标法分析 Human aryl hydrocarbon receptor,ahr ELISA KIT
ARB11632 人淋巴细胞功能相关抗原2(LFA-2/CD2)血清中含量检测 Human lymphocyte function associated antigen 2,lfa-2 ELISA KIT
BL1222 0.4% TTC染色液
ARB12755 小鼠C-反应蛋白(CRP)含量分析 Mouse c-reactive protein ELISA KIT
298-96-4 TTC 2,3,5氯化三苯基四氮唑
PY02-393 SCHAEDLER(斯氏)琼脂 250克
NF-208 羊抗人IgM血清
ARB12515 大鼠热休克因子1(HSF1)Elisa方法检测 Rat heat shock factor 1,hsf1 ELISA KIT
NF-267 HBS阳性对照
硝苯吡啶 Clarithromycin 21829-25-4
ARB10205 人β2糖蛋白1抗体IgG(β2-GP1 Ab IgG)Elisa分析 Human β2-glycoprotein 1 antibody igg,β2-gp1 ab igG ELISA KIT
ARB13138 小鼠前列腺特异性抗原(PSA)免费代测 Mouse prostate specific antigen,psa ELISA KIT
CYB166004-D 兔抗羊IgG-GOLD
庚二酸 4-Hydroxyphenylpyruvic acid 111-16-0
ARB13098 小鼠胃肠癌标志物CA199检测服务 Mouse gastrointestinalcancer marker-ca199 ELISA KIT
F030413 胶体金标记兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG*GOLD
ARB11423 人载脂蛋白C3(Apo C3)elisa检测 Human apolipoprotein c3,apo c3 ELISA KIT
Western及IP细胞裂解液优惠促销关键词:YT038,Western及IP细胞裂解液,Cell lysis buffer for Western and IP
·NF-E1凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT267
英文名称:YY1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的YY1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-YY1的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。YY1也称NF-E1或NF-δ。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
YY1 consensus oligo的序列如下:
5"-CGC TCC CCG GCC ATC TTG GCG GCT GGT-3"
3"-GCG AGG GGC CGG TAG AAC CGC CGA CCA-5"
EMSA突变探针-YY1中YY1的公认的结合位点发生了突变,从而使YY1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和YY1的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和YY1的结合的条带不会被抑制。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
我公司正在火爆促销蛋白质研究系列产品,欢迎您的垂询选购Western及IP细胞裂解液优惠促销。
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文献和实验其他方法验证更详细的相互作用信息。 图 11:使用抗体进行 Co-IP 与使用 Strep-Tactin®XT 进行pull-down 融合蛋白沉降 pull-down IP 和 Co-IP 通过固定抗体来捕获诱饵蛋白质及其结合分子,而 pull-down 可使用带亲和标签的目的蛋白进行,在体外验证蛋白间的直接相互作用。Pull-down 是通过磁珠/琼脂糖填料固定带有标记的「诱饵」蛋白,从细胞裂解液、纯化蛋白或表达系统中捕获「猎物」蛋白,然后将复合物蛋白分离后进行凝胶或质谱分析,从而确认互作
或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
(100μM)15高糖+D药物(100μM)+B药物(1mM) 免疫沉淀过程实验试剂:A抗体(santa cruz,IP浓度 1:100);B抗体(santa cruz,IP浓度 1:100);Protein A+G Agarose(上海维景生物)蛋白样品的准备:1).对于10厘米细胞培养皿中的贴壁细胞,吸除细胞培养液,PBS洗涤一次,然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。可以使用嘉美生物Western及IP细胞裂解液或各种RIPA裂解液等进行细胞的裂解。 2).对于组织样品参考贴壁细胞使用
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