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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
202
- 英文名:
Red Blood Cell Lysis Buffer
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")红细胞裂解液品牌,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:红细胞裂解液品牌
品牌:百奥莱博
规格:120ml
编号:RFT158
本裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。本裂解液经过优化配方,主要有效成分为*化铵,在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解,例如鸟或禽类的红细胞。本裂解液经过无菌处理,处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
使用方法:
一、对于组织细胞样品:
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、加入3-5倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入3-5ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
二、对于组织细胞样品无需洗涤的快速操作步骤:
1、新鲜组织经过胶原酶或胰酶等消化处理,通过适当方法分散成细胞悬液,离心弃上清。
2、对于0.2ml细胞沉淀加入1ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。本步骤在室温或4度操作均可。
3、加入15-20ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
4、400-500g离心5分钟,弃红色上清。4℃离心效果更佳。
5、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程中的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
三、对于血液样品:
1、取新鲜抗凝血,400-500g离心5分钟,离心弃上清。
2、加入6-10倍细胞体积的红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解1-2分钟。例如细胞沉淀的体积为1ml,则加入6-10ml的红细胞裂解液。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解1-2分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至4-5分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、洗涤1-2次:加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,重悬沉淀,400-500g离心2-3分钟,弃上清。可再重复1次,共洗涤1-2次。洗涤液的用量通常应至少为细胞沉淀体积的5倍。4℃离心效果更佳。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
注意:对于微量或少量的血液样品,可以在第一步中不进行离心弃上清的操作,直接在第二步中加入10倍血液体积的红细胞裂解液,并在室温或4℃裂解4-5分钟。对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。后续步骤相同。
四、对于血液样品无需洗涤的快速操作步骤:
1、每1ml新鲜抗凝血中加入10ml红细胞裂解液,轻轻吹打混匀,裂解4-5分钟。本步骤在室温或4度操作均可。注意:对于鼠的血液,裂解4-5分钟已经足够,对于人的外周血,宜延长裂解时间至10分钟,但通常不宜超过15分钟,并且裂解过程中宜适当偶尔摇动以促进红细胞裂解。
2、加入20-30ml PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,混匀。
3、400-500g离心5分钟,弃红色上清。4℃离心效果更佳。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
5、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明:对于常规步骤,多一步洗涤过程的离心,但可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好一些,同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心,但洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
注意事项:
1、本裂解液为无菌产品,请注意保持无菌,使用本产品时宜在超净工作台内进行。
2、如果经过红细胞裂解液处理后的样品后续用于总RNA的提取,在处理细胞时不必使用经过DEPC处理过的溶液。
储存条件:4℃,有效期12个月。
欲咨询购买红细胞裂解液品牌,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·青链霉素溶液(100×)
编号:RFT181
英文名称:Penicillin-Streptomycin Solution
规格:100ml
青霉素-链霉素溶液(100×)是专门用于细胞培养的双抗,经过过滤除菌,可以直接添加到细胞培养液内。一个包装即100ml青霉素-链霉素溶液(100×)可以配制10L细胞培养液。
青霉素-链霉素溶液(100×)中,青霉素的含量为10KU/ml,链霉素的含量为10mg/ml。该溶液用0.85%*化*配制。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml,即按照100倍稀释使用即可。
使用方法:
1、在无菌的细胞培养液中直接添加青霉素-链霉素溶液(100X),比如按照每500ml细胞培养液添加5ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X),混匀即可使用。
2、配制细胞培养液时加入青霉素-链霉素溶液(100X),然后再过滤除菌。配制细胞培养液时按照每配制1L细胞培养液加入10ml的比例加入青霉素-链霉素溶液(100X),配制完成后过滤除菌即可使用。
储存条件:-20℃。
红细胞裂解液品牌关键词:Red Blood Cell Lysis Buffer,RFT158,红细胞裂解液
·超低分子量蛋白Marker III(3.4~100kd)
编号:RFT046
英文名称:μltra Low Molecμlar Weight Protein Marker III
规格:10T(50μl)
本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成,分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。
使用说明:
第一次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用;本产品为即用型,融化后既能使用,不能95℃加热处理。
一. 制胶:
I 配制分离胶
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2.加入10%APS和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4.静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)
| 分离胶 | 浓缩胶 | |
| 18%T, 5%C /6.0ml | 5%T, 3.3%C/2 ml | |
| 40% PAA(19:1) | 2.7 ml | / |
| 40% PAA (29:1) | / | 0.25 ml |
| 4×凝胶缓冲液 | 1.5 ml | 0.5 ml |
| 乙二醇(电泳级) | 1.8ml | / |
| ddH2O | / | 1.25 ml |
| 10%APS | 50-65μl | 20μl |
| TEMED | 6μl | 2μl |
注:如非必须,不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶,尽量使用厚度0.75mm的凝胶,这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1.按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2.加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,立即混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3.将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4.静置30-60分钟装待凝胶聚合
二. 电泳:
1. 取一管分装好的Marker样品,彻底融化,不要加热处理,充分混匀后备用。
2. 电泳前,将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液,轻柔拔出梳子,将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔,根据表二条件进行电泳,至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注:如果电泳时间过短,染色时,指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件
| 恒电压 | 150 V |
| 起始电流 | 45-55 mA |
| 结束电流 | 10-15 mA |
| 电泳时间 | 2-3小时 |
三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
红细胞裂解液品牌关键词:Red Blood Cell Lysis Buffer,RFT158,红细胞裂解液
2,3,5-三碘*甲*(代"酸") RTCA 88-82-4
枸橼酸*抗凝剂(3.2%) 100ml
D-虫荧光素* 2-Nitrobenzaldehyde 103404-75-7
钼酸铵 9-Aminoacridine hydrochloride monohydrate 12054-85-2
铅盐染色液(玫棕酸法) 2×50ml
PY02-429 假单胞CFC选择性培养基基础 250克
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Bradford蛋白定量试剂盒 60次
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北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购红细胞裂解液品牌。
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bbdeng 有没有红细胞裂解液的配方?本人试了碧云天的红细胞裂解液,效果不大好,请高人指点! dnazyme http://baike.baidu.com/view/2601370.htm http://www.genialgenetics.com/products/reagents/erythrocyte-lysis-solution.html COMPOSITION
红细胞裂解液(Tris-NH4Cl):称取3.735g氯化铵、三羟甲基氨基甲烷(Tris)1.3g加水溶解并稀释至500ml。0.22μm滤膜过滤除菌,4℃保存。细胞悬液加红细胞裂解液后,混匀静止4-5分钟,待红细胞完全破碎,1000r/min离心5分钟,弃上清去除红细胞,得到白细胞沉淀。 结果第一次用的时候,觉得还可以,第二次和第三次用的时候离心后发现有絮状物质,不能很好的沉淀出白细胞
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