Pierce™IP裂解缓冲液

一篇搞定 IP、co-IP 实验

识别天然抗体的二抗 直接源头遏制：将抗体直接交联到 bead 上，或者将抗体交联到 protein A/G 上，避免洗脱干扰 4、靶蛋白没有条带 裂解液不合适，或者没有添加抑制剂，导致靶蛋白或者饵蛋白构象改变不能结合或者降解 饵蛋白较难洗脱，换成高强度的洗脱缓冲液 选用的抗体不合适，建议 IP 验证过的抗体，并优化下抗体用量 蛋白间为弱相互作用，或者相互作用依赖翻译后修饰 5、琼脂糖难离心，每次总会吸上来一点儿 使用带滤膜的离心柱，下部有接样管，琼脂糖完全截留在滤膜上 换成磁珠 更多

小鼠药物干预后两种蛋白的磷酸化酪氨酸水平检测

(100μM)15高糖+D药物(100μM)+B药物（1mM） 免疫沉淀过程实验试剂：A抗体（santa cruz，IP浓度 1:100）；B抗体（santa cruz，IP浓度 1:100）；Protein A+G Agarose（上海维景生物）蛋白样品的准备：1).对于10厘米细胞培养皿中的贴壁细胞，吸除细胞培养液，PBS洗涤一次，然后加入500微升至2毫升细胞裂解液裂解细胞。可以使用嘉美生物Western及IP细胞裂解液或各种RIPA裂解液等进行细胞的裂解。 2).对于组织样品参考贴壁细胞使用

NuPAGE® 凝胶试剂帮你解开电泳误区

性(图1)。NuPAGE® 样品缓冲液的pH值不会低于pH 8(即使是加热到70°C)，因此样品制备过程中蛋白样品不会降解。 图1. 看看NuPAGE® 凝胶的与众不同之处。(A) NuPAGE® 凝胶利用1×MES缓冲液运行。(B) tris-甘氨酸凝胶利用tris-甘氨酸/SDS缓冲液运行。图片显示，与tris-甘氨酸凝胶相比，NuPAGE® 凝胶产生锐利、完整的条带，代表了未水解的蛋白，特别是在第3、5、7、8和9道。 样品上样：(1) Mark12™