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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
110
- 英文名:
GST-Beadose Resin (Settled Resin)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏(2-8℃)
- 规格:
5mL|10mL|25mL|100mL
特别提示:包括GST 琼脂糖在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:GST 琼脂糖
英文名称:GST-Beadose Resin (Settled Resin)
产品货号:GS4386
产品规格:5mL|10mL|25mL|100mL
储存条件:冷藏(2-8℃)不可冻存
概述
日本血吸虫来源的谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是基因工程重组蛋白设计和表达过程中一种常用的融合标签。重组蛋白与GST融合后,不仅稳定性提高、可溶性增强,而且为下游的分离纯化带来了极大地方便。GST分子量约为26kDa,与还原型谷胱甘肽(GSH)有极强的亲和力,因此可以利用固定化的GSH实现对GST融合蛋白的一步亲和纯化。
特点
- 用于分离纯化带有GST标签的可溶性重组蛋白,溶解于高浓度变性剂的包涵体蛋白不能用这种介质纯化;
- 特异性好、与GST融合蛋白亲和力高,从细菌破碎液中经一步亲和纯化即可得到纯度超过95%的目标蛋白;
- 结合在介质上的GST融合蛋白,可被溶液中高浓度的还原型谷胱甘肽(GSH)(33mM)竞争性洗脱。对不同的GST融合蛋白来说,无需摸索最佳的GSH洗脱浓度,使介质的使用更加简单;
- 可再生,并反复使用。
组份
5ml/10 ml/25ml/100 ml瓶
技术规格
| 基质 | 高度交联的4%琼脂糖 |
| 颗粒大小 | 40~130μm |
| 结合载量 | 约10mg重组GST标签蛋白/ml填料 |
| 流速/压力 | 50-300cm/h(推荐),3 bar(0.3 MPa,最大) |
| pH稳定性 | 3-12 |
| 化学稳定性 | 所有常用的缓冲液,1M醋酸、0.1 M NaOH,70%乙醇,6 M盐酸胍(室温中1小时) |
| 贮存液 | 20%乙醇 |
我公司销售的GST 琼脂糖北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化:①
mL PBS 1X 4- Centrifuge (1pulse at 500g) 5- Resuspend in 10 mL PBS 1X (stable for one month at 4 _ C) b) Extract preparation: 1- Transform BL21 or any appropriate bacterial strain with your GST-fused cDNA. Always use freshly transformed cells
with 1/2 volume of 50% GST beads at 4C rocking on the Nutator for 30-60 minutes. 50 ml conical Falcon tubes work well. Pour into a BioRad Column and drain lysate. Save 100 ul of depleted lysate. Load 2.5 ul for SDS-PAGE. Wash beads with 3 column volumes
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