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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Zero Background pTOPO-TA Cloning Kit
- 保质期:
有效期 2个月
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
长时间储存于 2-8℃避光保存
- 规格:
20次x10u
产品介绍;
零背景pTOPO TA克隆含多克隆酶切位点MCS和传统的T4连接酶原理不同,它利用了Topoisomerase可以在瞬间(几秒钟-几分钟)、高效(接近100%)连接DNA片段的原理采用本公司独创的工艺制成。
特点:
1. 可以在瞬间(几秒钟-几分钟)完成连接。
2. 无需冰浴和热休克,室温5分钟内完成转化;无需1小时复苏,只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景,无需繁琐蓝白斑筛选,见到长出的克隆便是有插入的(接近100%)。
4. 可以连接长达10kb片段(即使连接5kb片段,挑10个菌落,至少8个是有插入的),是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO TA克隆载体。
注:本TOPO载体连接体系是按照10ml计算,如果按照其它公司产品5ml计算,实际使用次数可以增加一倍,20次实际可用40次。
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文献和实验PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法,杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单,快速和高效的原因,成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明,并拥有全球TA Cloning商标的专利权。TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含
,ccdB基因的表达蛋白,会破坏细菌的DNA gyrase,造成细菌染色体的降解导致细菌死亡。如果有插入片断,则ccdB基因表达受到阻碍,所以细胞可生长。这样可以把高背景的缺点改善,节省筛选的时间。Topo平端克隆 与Topo TA方法一样,操作简单快速。 平端PCR 克隆 方法(Zero Blunt PCR Cloning Kit) Zero Blunt PCR 克隆 乃利用传统T4连接酶方法,但载体
Cloning PCR products using TA vectors
which can be used for this, including the pBluescript derivative pCR-Script [TM] SK(+) cloning kit from Stratagene, pCR [TM] II supplied with the TA Cloning [TM] kit from Invitrogen, pT7Blue T-Vector kit from Novagen, pGEM[R]-T from Promega, and the SureClone [TM
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