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51
- 英文名：
Collagenase II
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详见说明书
- 供应商：
上海一研
- 保存条件：
低温
- 规格：
100mg
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中文名称：胶原酶II型
英文名称：Collagenase II
产品规格：100mg
发货周期：1～3天
本品为II型胶原酶，≥125 U/mg solid，可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。本品来源于溶组织梭菌（Clostridium histolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidase A）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。
胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型：胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向：
1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃，pH7.5 的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件：4℃，有效期两年
胶原酶II型使用注意事项
1． 微量试剂取用前请离心集液。
2． Annexin V-EGFP，Propidium Iodide（PI）避光保存及使用。
3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7． 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
2. 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞；细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素确定）。
3. 接种的细胞按照实验需要，送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物；
4．培养结束后，每孔加入20微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育3－6小时；
5．孵育结束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃细胞培养箱内再继续孵育，直至在镜下观察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会略长。
6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
E3连接酶抑制素受体抗体英文全称matrix metalloproteinase 16英文简称MMP-16检测范围4870nmol/L-20ng/mL
HEG同源蛋白1抗体英文全称Citrate synthase, mitochondrial英文简称CS检测范围4871nmol/L-200U/L
缺氧诱导基因1C蛋白抗体英文全称phosphatidylinositol(4)bisphosphate英文简称PIP4检测范围4872nmol/L-20ng/mL
肿瘤抑制蛋白抗体英文全称Cytochrome P451英文简称CYP451检测范围4873nmol/L-160U/L
丙型肝炎病毒NS5B抗体英文全称Cytochrome P450 17A1英文简称CYP17A1检测范围4874nmol/L-100ng/mL
Hemk甲基转移酶家族1号蛋白抗体英文全称Cytochrome P450 11B1英文简称CYP11B1检测范围4875nmol/L-16ng/mL
Hemk甲基转移酶家族2号蛋白抗体英文全称phosphorylated Phosphotylinosital 3 kinase英文简称P-PI3K检测范围4876nmol/L-1000pg/ml
HEN1甲基转移酶同源蛋白1抗体英文全称AICAR transformylase英文简称ATIC检测范围4877nmol/L-20ng/ml
乙肝病毒衣壳蛋白抗体英文全称ATIC英文简称ATIC检测范围4878nmol/L-20ng/ml
丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗体英文全称Diphtheria toxin A英文简称DT-A检测范围4879nmol/L-20ng/mL
戊型肝炎病毒抗体英文全称PKR-A英文简称PKR-A检测范围4880nmol/L-8ng/mL
亚铁酶抗体英文全称Protein Kinase IFN Double Stranded RNA Activator英文简称PACT检测范围4881nmol/L-20ng/mL
鸟苷酸释放因子p532蛋白抗体英文全称Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2 (IDO2)英文简称IDO2检测范围4882nmol/L-200ng/mL
HERC2 E3泛素蛋白连接酶抗体英文全称Tumor Necrosis Factor Alpha Induced Protein 6英文简称TNFaIP6检测范围4883nmol/L-10000pg/mL
HERC3 E3泛素蛋白连接酶抗体英文全称Megalin Ab英文简称Megalin Ab检测范围4884nmol/L-
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1）胶原酶I（Type I Collagenase）：含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（Type II Collagenase）：含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（Type III Collagenase）：含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（Type IV Collagenase）：含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
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1． 微量试剂取用前请离心集液。
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3． Propidium Iodide （PI）有毒，操作时请戴手套。
4． 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5． 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，需用不含EDTA的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。
6． 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
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使用说明
1. 细胞的增殖和细胞毒实验，一般可在96孔细胞培养板中进行。
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6. 在570nm测定吸光度。如无570nm滤光片， 560-600nm范围的滤光片均可使用。
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