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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海研生
- 库存：
47
- 英文名：
详见说明书
资源名称 LA795
种属 小鼠肺腺癌细胞系
形态 上皮样
培养方法
培养基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
传代方法 1:6传代；2天1次。
生长特性 贴壁生长
存储条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
详细说明
传代情况 C3
支原体检测 培养法（-）
染色体 55~64
使用权限 A类
描述 1979年5月建系；取自T739近交系小鼠自发乳头型肺腺癌。原代培养建系，24小时细胞开始生长，首次传代45天,上皮样圆形细胞，贴壁生长，T739、615、Km小鼠皮下移植成功；T73
运输和保存：
LA795视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
培养细胞冻存方案：
LA795以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案，必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基，于2°C至8°C下储存，直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时，利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度，计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液，不要搅动细胞沉淀。
注：离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀，将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时，应不时轻轻混合细胞，使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞，使温度每分钟大约降低 1°C。或者，将装有细胞的冻存管放入冻存盒中，然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。
他进口/国产ALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四15脂合酶1体HPLC法含量测定
HPLC≥98%C肽检测试盒20mgADA-2
GST-Tag英文名称：CDK8(Cyclin Dependent Kinase 8)细胞纤毛内转运同源蛋白172抗体
索进口/国产ABI3BP ABI因家族成员3结合蛋白体HPLC法含量测定
连翘苷进口/国产SDF4 质细胞衍生因子4体（钙结合蛋白）含量测定
Gentamicin/OVA英文名称：Cdkn1c/p57/Kip2 (Cyclindependent kinase inhibitor 1C)丝氨/苏氨蛋白激酶ICK抗体
洛伐他汀进口/国产MTCBP1/ADI1 膜型质金属蛋白酶胞质尾结合蛋白1体HPLC含量测定 9004-54-0高端化学试组织蛋白酶W(CTSW)检测试盒(酶免疫吸附试验法)
蛇床子进口/国产SECTM1 分泌和跨膜蛋白1体含量测定
human Serum albumin英文名称：CGP-39/YKL-40(Chitinase-3-like protein 1 )肽酰tRNA水解酶ICT1抗体
LA795高端化学,固相合成, 5--2-噻吩叔磺酰胺
Dimethisoquin Hydrochloride进口、国产2773-92-42g
TFPI-2英文名称：RPA70真核翻译起始因子4B抗体
高端化学,合成试, 泰洛星
Dimethyl Sulfoxide进口、国产67-68-53g
TGF alpha英文名称：Retinal S antigen磷化转录接头蛋白EP300抗体
高端化学,固相合成, 异
Dinoprost Tromethamine进口、国产38562-01-550mg USP级，1：30000>98.0%(GC)5gL-3-HCoAdh
TGF Beta 1英文名称：RAMP2磷化上皮细胞癌转化蛋白2抗体
具体操作：
1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液：大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。
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文献和实验试剂因厂家不同会有差异，目前市售乳胶凝集反应试剂盒可以检测出10 ng /mL 的荚膜多糖抗原。Babady NE检测3种市售的乳胶凝集试剂发现在终点滴度上有很大差异。还有人认为LA需要花费人工，并且判断结果带有主观性，投入产出效率不高。 为了弥补LA检测隐球菌抗原的缺点，很多美国的实验室开始运用EIA。EIA的优点是可以实现自动化和客观的结果分析，并且不受类风湿因子的干扰。有一些研究用来比较EIA和LA。Saha DC收集127份脑脊液样本，分别用LA，EIA和直接培养来检测。结果是当培养
钠，（pH 5.5)，MilliQ 水配制， 4°C 贮存。 ( 15 ) 25% TCA。 ( 16 ) Bio-Rad 标准：10%~20% 丙烯酰胺凝胶（cat.编号 345-0042 ) 或其他厂家的 SDS-PAGE 凝胶。 ( 17 ) 考马斯亮蓝 R-250 染色液： 1 g/L，40% 甲醇、5% 乙酸，MilliQ 水配制，或其他合适的染色液。 ( 18 ) 脱色：40% 甲醇、5% 乙酸，MilliQ 水配制，或其他合适的脱色液。 ( 19
测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Biosystems Inc.的DyeDeoy TM Terminator Cycle Sequencing Kit（＃401434）或FS-DNA Sequencing Kit（＃402079）进行。操作过程主要根据厂家推荐的方法进行。具体操作方法如下。3.1 混合反应物（1）取2.5μl 纯化好的PCR 产物［相对于2.5μl 测序试剂盒中的pGEM-3Zf（＋）DNA］，进行琼脂糖凝胶电泳。（2）凝胶用溴化乙锭染色，用流水
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