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上海研生
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30
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详见说明书
TE-10以下实验方案介绍了培养细胞冻存的一般流程。详细的实验方案,必须参阅针对具体细胞的产品说明书。
1.配制冻存培养基,于2°C至8°C下储存,直至使用。请注意使用何种冻存培养基取决于所用细胞系。
2.冻存贴壁细胞时,利用传代时所用方法轻柔地使细胞从组织培养容器上脱离下来。用该细胞所需完全培养基重新悬浮细胞。
3.采用血球计数器、细胞计数仪按照台盼蓝拒染法或者使用 Countess®自动细胞计数仪测定总细胞数和活细胞百分比。根据所需活细胞密度,计算冻存培养基需要量。
4.以大约100-200×g的离心力将细胞悬液离心5至10分钟。在无菌条件下小心倒掉上清液,不要搅动细胞沉淀。
注:离心速度和时间取决于细胞种类。
5.用预冷的冻存培养基重新悬浮细胞沉淀,将其调整至该细胞适合的活细胞密度。
6.将细胞悬液分装到若干冻存管中。分装时,应不时轻轻混合细胞,使其保持均匀的细胞悬液状态。
7.使用可控制降温速度的冷冻装置冷冻细胞,使温度每分钟大约降低 1°C。或者,将装有细胞的冻存管放入冻存盒中,然后将冻存盒置于-80°C条件下过夜。

资源名称 TE-10
种属 人食管癌细胞
类型 食管癌
提供形式 P4-5代T25细胞培养瓶
培养方法
培养基 90%DMEM+10%FBS
生长特性 贴壁生长
详细说明
动物种别 人
供应限制 暂不供应
描述
具体操作:
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的*作空间,不仅便于*作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。
6.取出预热好的培养用液:大鼠主动脉平滑肌细胞取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
运输和保存:
TE-10视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
人中脑星型胶质细胞来源神经营养因子(MANF)酶联免疫吸附测定试剂盒 1g
293A (人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H035人肠静脉内皮细胞完全培养100mL 人支气管上皮细胞RNAHBEpiC miRNA5 μg
L-谷;L-Glutamic aci 订购|咨询 100mg 短粗矮胖19蛋白样1体 EXTL1 ELISA Kit 外生骨疣样蛋白1(EXTL1)ELISA试盒
人丝裂原激活蛋白激酶激酶1(MAP2K1)酶联免疫吸附测定试剂盒10g
CM-R105大鼠神经元细胞完全培养100mL
壬(>99.5%(GC),标准物) 质量>99.5%(GC),标准物质 Nonane 人皮肤成纤维样细胞英文名称:HSF
人芳香烃受体(AhR)酶联免疫吸附测定试剂盒 100g
CD226 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD22 人细胞裂解液 (阳性对照)
粗壮女贞苷N 订购|咨询 HPLC≥98%;10mg ELISA Kit for Human Protein S100-B大鼠葡萄糖6异构酶(GPI)ELISA试盒,GPI ELISA Kit
TE-10HPLC≥98%乏因子Ⅴ血浆5mg14,15-EET
英文名称小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 25mg
CEPT1英文名称:CMYA2人肌红蛋白(MYO/MB)免疫试剂盒
HPLC≥98%乏因子Ⅶ血浆5mgsTLR4
英文名称大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 200mg
phospho-SHC (Tyr317)英文名称:TumstatinG蛋白偶联受体MRGX2蛋白抗体
HPLC≥98%乏因子Ⅷ血浆5mgCA125 英文名称对照品人载脂蛋白体A1(Apo A1)ELISA Kit,48T/96T 50mg
英文名称兔子Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA Kit,48T/96T 15mg
TRIM21英文名称:TBX3G蛋白偶联受体RDC1蛋白抗体
注意事项:
1. 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
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文献和实验Nature Genetics:王艇团队从转座子中发现泛癌症新抗原
描述肿瘤特异性转座子-基因嵌合转录本的特征,并评估它们成为 33 种癌症类型的免疫疗法靶标的潜力。 研究团队首先开发了一个新的算法 TEProF2(TE Promoter Finder 2),用于从转录组数据中识别从转座子开始拼接到基因的嵌合转录本(TE-gene chimeric transcripts,TETs)。 然后,研究团队把 TEProF2 应用到 TCGA 数据库中的 10357 个肿瘤和 729 个病人正常组织样本上,以全面剖析这些转录本在 33 种癌症类型中的表达。后续通过分
, resuspend in 2 ml 1 x LiAc/ 0.5 x TE incubate at RT for 10 min combine in tube: 100 µl cells, 10 µl salmon sperm DNA (10 mg/ml), up to 15 µl DNA to be transformed add 700 µl 1 x LiAc / 1 x TE / 40 % PEG mix incubate for 30 min
11 篇 Science 连发!今日特刊解析基因组的关键之处,揭示人类健康和疾病的相关信息
。通过他们的分析,研究人员也验证了这一假设,并能够确定至少 10% 的人类基因组是有功能的,大约是蛋白质编码(1%)的十倍。研究结果进一步揭示了遗传变异可能在罕见和常见的人类疾病(包括癌症)中起到因果作用。 如果某些东西对物种正常的功能很重要,那么它往往会在进化过程中被保存下来,即进化约束概念。因此,进化约束是衡量基因组中特定区域在生命进化树上的变化程度。 在今日 Science 特刊的一篇研究 Leveraging base-pair mammalian constraint to understand
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