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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 库存:
大量
- 英文名:
Trypsin 1:250
- 运输方式:
冰袋运输,长时间储存于 2-8℃避光保存。有效期 2个月
- 规格:
25g
高浓度的胰蛋白酶浓度孵育细胞或过长的时间周期
会损伤细胞膜并导致细胞死亡。原代细胞特别敏感。
如果不确定使用的胰蛋白酶的浓度,使用低浓度稀释(1:10或1:5)。
消化浓度和时间取决于细胞类型、种群。
来源:猪胰腺
产品说明:
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
由于组织或细胞性质不同,应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
配置好的液体不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验心后上清液用二层纱布过滤。滤液置250mL 烧杯 中,以过滤清液的体积为准,加入粉末状硫酸铵,搅拌溶解,使溶液硫酸铵饱和度为20%。放置 6h后,3 500 r/min离心20min,保存上清液待用,取沉淀。沉淀分别用适量95%乙醇洗涤过滤,再用丙酮洗涤,过滤。最后将沉淀置于表面皿上自然干燥,即得胰蛋白酶粗品Ⅰ。在上述离心上清液中,加入粉末状硫酸铵,搅拌溶解,使上清液溶液达到55%硫酸铵饱和度,放置 6h后,3 500 r/min离心30min,取离心沉淀,分别用适量95%乙醇、丙酮洗涤
样品:重组胰蛋白酶,比活 4500USP u/mg pro.,上海雅心生物技术有限公司,纯度如图 1 所示。BAEE,Sigma. 图 1. 重组胰蛋白酶的纯度的 SDS-PAGE 鉴定 1. 最适 pH 的研究 准备 pH 为 3~12 的底物 BAEE(0.25 mM),分别测定 rPT 纯酶液的活性,最后结果表示为测定数值占最高酶活的百分比。缓冲液成分依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25
问:有人说白颜色胰蛋白酶的要比黄颜色的效果好,是吗?我近期买的胰蛋白酶倒是白颜色的,但是不能溶解在PBS中,呈细小的悬浮颗粒状,是GIBCO公司出产的。这会是什么原因呢?望各位师兄师姐回复。 答:以我们的经验确实是这样的,我们做过比较的是白颜色的比较好,究其原因我们认为是黄颜色的胰蛋白酶提纯不够,里面混有杂质所致。
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