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- 文献和实验
- 技术资料
- 是否是肿瘤细胞:
0
- 规格:
株
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文献和实验基成分:89% DMEM (Gibco # 12100-046)10% FBS (Gibco # 16000-044)1% NEAA (Gibco # 11140-050)MEF每传一代就会生长得更慢些。你第一次传代的比例可以是1:5,但是最后一次的传代(第4代或第5代)比例应该是1:2。小鼠胚胎成纤维细胞的冻存 重悬培养基: 80% DMEM 20% FBS 1% NEAA 冻存培养基: 60% DMEM 30% FBS 20% DMSO 1、用不含钙镁离子的PBS洗一次细胞
MEF(Mouse Embryonic Fibroblasts,小鼠胚胎成纤维细胞)分离自孕鼠 E12.5-E14.5胚胎躯干组织,细胞呈细长梭形、贴壁生长,为有限传代原代细胞,P2-P5是最佳使用区间,传代超过该范围后增殖能力逐步下降、发生衰老。MEF有两大经典应用方向:其一,经辐照或灭活后,用作ES/iPS等干细胞的饲养层细胞;其二,作为研究细胞衰老、DNA损伤、氧化应激、iPS重编程及基因功能的模式细胞。MEF对培养密度高度敏感,接种过疏易提前衰老,汇合度过高也会加速老化,培养可参照
注意观察你的培养瓶。 注释: 我们已用CF-1品系的鼠制备了成纤维细胞。 培养基成分: 88% DMEM 10% FBS 1% NEAA 1% 双抗 对于新建立的细胞系,要对样本进行支原体检测。 小鼠胚胎成纤维细胞的消化/传代 1、移去MEF培养基 2、用5ml不含钙镁离子的PBS洗涤细胞(以去除胰蛋白酶的抑制物)。 3、每个培养瓶里加入1.5ml
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