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- 2025年11月18日
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- 供应商：
复祥生物
- 细胞类型：
普通细胞株-科研实验
- 物种来源：
牛
- 运输方式：
常温
- 生长状态：
良好
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大量
EBTr (NBL-4) 牛胚气管细胞
MEM培养基(GIBCO)+10%胎牛血清。细胞货期8-10个工作日
上海复祥生物提供 ATCC 细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞|贴壁细胞|悬浮细胞|,细胞库管理规范,提供的细胞株背景清楚,提供参考文献和培养条件,网站上有细胞照片,欢迎各位老师来电咨询!
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ATCC® Number: CCL-44™
Designations: EBTr (NBL-4)
Depositors: AJ Kniazeff, WA Nelson-Rees, NB Darby
Biosafety Level: 1
Shipped: frozen
Medium & Serum: See Propagation
Growth Properties: adherent
Organism: Bos taurus (cow)
Morphology: fibroblast
Source: Organ: trachea
Disease: normal
Permits/Forms: In addition to the MTA mentioned above, other ATCC and/or regulatory permits may be required for the transfer of this ATCC material. Anyone purchasing ATCC material is ultimately responsible for obtaining the permits. Please click here for information regarding the specific requirements for shipment to your location.
Virus Susceptibility: bovine viral diarrhea; infectious bovine rhinotracheitis; parainfluenzavirus 3; herpes simplex; reovirus 3; vesicular stomatitis (Ogden); vaccinia
Virus Resistance: human adenovirus 5; poliovirus 2; coxsackievirus A9, B5
Reverse Transcript: negative
Age: embryo
Gender: male
Comments: The cells are negative for bovine viral diarrhea virus (BVDV). [22883]
Propagation: ATCC complete growth medium: The base medium for this cell line is ATCC-formulated Eagle's Minimum Essential Medium, Catalog No. 30-2003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.
Temperature: 37.0°C
Subculturing: Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:2 to 1:4 is recommended
Medium Renewal: Twice per week
Remove medium, and rinse with 0.25% trypsin, 0.03% EDTA solution. Remove the solution and add an additional 1 to 2 ml of trypsin-EDTA solution. Allow the flask to sit at room temperature (or at 37C) until the cells detach.
Add fresh culture medium, aspirate and dispense into new culture flasks.
Related Products: Recommended medium (without the additional supplements or serum described under ATCC Medium):ATCC 30-2003
recommended serum:ATCC 30-2020
References: 22883: Bolin SR, et al. Survey of cell lines in the American Type Culture Collection for bovine viral diarrhea virus. J. Virol. Methods 48: 211-221, 1994. PubMed: 7989438
27802: Vassilev VB, et al. Authentic and chimeric full-length genomic cDNA clones of bovine viral diarrhea virus that yield infectious transcripts. J. Virol. 71: 471-478, 1997. PubMed: 8985373
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文献和实验细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作，培养箱静置2-4小时。镜下观察：未超过80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液收集至离心管中，加入6ml完全培养基，放入37℃、5%CO2孵箱培养；超过80%汇合度时，根据情况传代或者冻存，具体操作见细胞培养步骤。（注意发货的是密封培养瓶的话，处理完后放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松，传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基，另外一瓶用自己配的完全培养基）
三、细胞培养步骤
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
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