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- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV) NSs Gene cDNA Clone, expression ready, C-FLAG-tagged
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SFTSV-NSs
反应种属:SFTSV
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus (SFTSV) (isolate JS2011-004) NSs with C terminal Flag tag.
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文献和实验会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
酶 蛋白酶表达质粒 Amp PBV220载体,42℃表达,His 纯化,蛋白酶切 ULP酶 蛋白酶表达质粒 Amp PET22b载体,25℃,0.5mM IPTG,4h表达,His纯化,蛋白酶切 HRV 3c酶(pp酶) 蛋白酶表达质粒 PET载体,30℃
表达时长 瞬时 vs 长期 慢病毒/AAV 整合或长期表达,质粒只瞬时 细胞难度 易转染 vs 难转染 难转染细胞优先病毒送递 效果确认 QPCR/WB/测序 过表达干扰看 QPCR+WB,敲除看测序 哪些场景更适合 想快速看一个编码基因的功能,过表达加标签(FLAG/HA/MYC/EGFP)最方便,做互作、定位都好用;想做"基因缺失"的严格表型,敲除更干净,但周期长、要筛选克隆;只是想暂时压一压表达看趋势,干扰性价比高、来得快。有些基因压低后表型不明显,这时候过表达和干扰两头做
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