Sino Biological 大鼠tPA基因ORF cDNA克隆载体 全长克隆 大鼠cDNA克隆载体

那位老师能帮我详细解这些题？方法？步骤

1. 假设下列是小鼠基因组DNA的一个片段，其中含有开放阅读框（ORF）吗？若有请标出起始和终止密码子位置。一般来说，该ORF是基因 编码序列的可能性大吗？ tctcaagaagatgtcgattccattctccaaccatcttagactcttcatgaggaaaaagaggaaaacaagttgaggacacggttttacctccaggac 2. 你设计了一对PCR引物，其中上游引物为22个碱基。公司代为合成后提供的产品是总量为2 OD的冻干物。请回答如何用TE缓冲

PCR和RT-PCR

PCR基础 聚合酶链式反应（PCR）过程利用模板变性，引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程，因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板，使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般，经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到。反应包括几个成分（表1）。模板可以为纯化的基因组或质粒DNA；由RNA转化得到的cDNA；或未经纯化的粗制生物样品，如细菌克隆或噬菌斑。引物确定了扩增产物的序列和长度。最常用的热稳定聚合酶是Taq DNA

我用pp5.0设计的引物，高手帮忙看看选择哪个好啊！

.6 4. 引物5 524 60.3/51.9 60/50 55.8 同时，怎么blast引物啊，我不太会看过程和结果。能否好人做到底啊？ 怎么选择内参照啊，下面的是我在引物库里找的大鼠的beta-actin ,GAPDH,选哪个呢？？？ 1.物种：人或鼠 2.基因名称：beta-actin 3.模板：cDNA 4.PCR类型及目的：RT-PCR 5.forward primer(5’-3’): CCA AGG CCA ACC GCG AGA AGA TGA C reverse primer