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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
−20℃保存一年,避免反复冻融,单次用量少时应适量分装
- 保质期:
1年
- 英文名:
EZ-T™ Cloning Vector
- 库存:
大量
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
ml/盒
EZ-T载体是高效、便利的PCR产物克隆专用载体。该载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒,在EcoRI识别位点处添加了适当序列,经酶切处理后获得具有突出的3’-端T碱基的线性载体。EZ-T载体可与Taq 或Tth 等DNA聚合酶催化的携带3’-端A碱基的PCR产物互补连接,以利于下一步克隆或测序。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物,也可经Taq DNA聚合酶添加3’-端A碱基后,与EZ-T载体连接。
EZ-T载体多克隆位点区插入位点两侧均设计了EcoRI酶切位点,因此既可使用EcoRI单酶切,也可使用其他适当的内切酶双酶切,释放插入片段进行检测或亚克隆。EZ-T载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点,故可用于克隆含上述酶切位点的基因。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse或T7 promoter和T3 promoter 通用型引物。
用途
· PCR产物测序和亚克隆
· 利用lac promoter进行基因表达
特点
- 阳性率高:高纯度酶切型线性T载体,重组效率更高,蓝斑率低于10%
- 方便灵活:可于4℃运输;可与任何品牌T4DNA连接酶配合使用
- EZ-T™载体含多个常用酶切位点,利于无适当酶切位点DNA片段的亚克隆
- 插入对照:提供纯化的PCR片段作为阳性对照
- 无NdeI或NcoI位点,利于重组表达基因的亚克隆
- 蓝白筛选:高表达活性的b-半乳糖苷酶,显色更快更深
- 批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测
产品组分
| EZ-TTM Cloning Vector(40 ng/μl) | 20 μl |
| Control Insert(40 ng/μl) | 5 μl |
保存条件
−20℃保存一年,避免反复冻融,单次用量少时应适量分装
质量控制
使用GenStar T4 DNA连接酶进行连接时,当插入DNA对照(800 bp)与载体的摩尔比例为3:1时,蓝斑率低于5%,有90%以上的白色菌落含插入DNA对照片段。经测序确认多克隆酶切位点及T碱基存在。
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文献和实验载体 vector,cloning vector,carrier
载体 vector , cloning vector , carrier ( 1 )指 DNA 重组实验使用的将被限制酶切断的供体 DNA 小片连起来令其繁殖的小型有自发繁殖能力的 DNA 分子。因用于 DNA 的克隆繁殖,所以也称克隆繁殖载体。一般是使用无传递性的小型质粒或病毒的 DNA ,但细胞器 DNA 或含有寄主染色体 DNA 的复制起始点的 DNA 小片也可用作载体。作为载体须具备下列条件:( 1 ) DNA 可有效地注入活细胞中;( 2 )为了了解注入细胞
will then decide on the tools required, e g., DNA probes, antibodtes, or functional assays, and help to determine the vector/host system and type of library to be used
is that of which plasmid to use in a particular project? Despite the bewildering choice of commercial and other available vectors, the choice of which cloning vector to use can be decided by applying a small number of criteria: insert size, copy number, incompatibility
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