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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Rat Angiotensin Converting Enzyme 1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ACE
反应种属:Rat
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Rat angiotensin I converting enzyme (peptidyl-dipeptidase A) 1 with C terminal Flag tag.
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文献和实验出来,可能两个原因,第一个是抗体不好,第二个可能是质粒没做好,发生移码了,因为你用的是pEGFP-N2载体,gfp是在n端,就算发生了移码一样可以检测到绿色萤光,仔细检查下你做的质粒看看是否正确。 liuruya 谢谢大家的回复 1.WB应该是没有技术问题,用的是GFP或flag的标签抗体,而且设置了之前做过的基因做阳性对照 2.GFP质粒测序过是完整的且没有移码,flag的是自己构建的也反复check过没有问题 觉得很妖怪 问了当时给我质粒
常见表位标签和序列常用表位标签的生物化学特性总结如下:氯霉素乙酰转移酶(CAT)这个 24kDa 大小的标签也用作报道基因,与大多数蛋白质融合时依然能保留其活性。这意味着它可以用来直接测量表达水平,而不需要 PAGE 或免疫检测。二氢叶酸还原酶(DHFR)这个 25kDa 蛋白质参与胸苷生物合成途径。带有这个标签的蛋白质的纯化可以通过甲氨蝶呤连接的树脂实现。FLAG带电的八肽序列(DYKDDDDK),可用于蛋白检测,特别是在串联为 3xFLAG™表位(DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDK
因子)的功能,经常需要把表达这个蛋白的细胞分离纯化出来。这个时候可以将HuCD2或Thy1.1报告基因放置在这个细胞内蛋白基因启动子下(比如加一个IRES-Thy1.1), 这样所有表达这个细胞内蛋白的细胞都会在细胞表面表达Thy1.1。这样就可以用anti-Thy1.1抗体将这一群细胞分离出来,进行后续研究。当然也可以用anti-Thy1.1抗体进行组织切片的免疫 荧光检测。 HA、FLAG、Biotin等是细胞和生化实验中常用的标签多肽或蛋白。在western blot ,免疫
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