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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human Neurotensin Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:NTS
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Homo sapiens neurotensin.
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文献和实验,在分裂细胞里会随着细胞分裂被稀释掉,通常几天到两周信号就明显下降;在不分裂的细胞(比如神经元)里反而能维持相当长时间的表达。这一点很重要——非整合不等于"表达时间短",取决于你的细胞是不是在分裂。 和常规慢病毒到底差在哪里 从生产角度讲,差异比很多人想的要小。吉凯的做法是:非整合慢病毒穿梭载体和常规慢病毒一样,只是把 pspAX2 的整合酶做了突变,失去整合能力,因此三质粒里只有其中一个包膜/包装质粒不一样(H1 整合酶突变,对应克隆 KL18334)。目的质粒的构建、启动子、报告基因、抗性标记全都
表达或小RNA干扰作用持续且稳定,并随细胞基因组的分裂而分裂(图1)。 图1 慢病毒作用机制 慢病毒载体具有宿主范围广,免疫原性低,基因容量大,可以长期表达等特点。能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞。 慢病毒的感染具有整合特性,能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上,达到持久性表达,因而可构建稳转细胞株,用于基因的细胞功能研究。使用慢病毒载体改造T细胞可用于CAR-T细胞治疗,CRISPR/Cas9文库构建使用的也是慢病毒
质粒、RNP、AAV、脂质纳米颗粒……CRISPR 的递送方式有很多,但慢病毒始终是最主流的一种。这不是习惯,而是慢病毒的生物学特性恰好匹配了 CRISPR 实验的多个硬需求。 先说结论:慢病毒的核心优势有四个——能感染难转染细胞(包括原代和悬浮细胞)、整合进基因组实现长期表达和抗性富集、可通过 MOI 精确控制感染拷贝数(这是文库筛选的基础)、可包装较大的表达盒。代价是周期较长、Cas9 持续表达增加脱靶累积、以及需要 BSL2 操作条件。 --- 一、优势一:突破"难转染"的限制 脂质
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