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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human OAF homolog/NS5ATP13TP2 Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:OAF
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Homo sapiens OAF homolog (Drosophila).
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文献和实验蛋白转位至自噬体膜,在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点,一个斑点相当于一个自噬体,可以通过计数来评价自噬活性的高低。 mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系: mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品 mRFP 用于标记及追踪 LC3,GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体。由于 GFP 荧光蛋白对酸性敏感(pH 敏感),当自噬体与溶酶体融合后 GFP 荧光发生淬灭,而 mRFP 相对稳定,因此只能检测到红色荧光。 1. 哺乳动物 LC3 表达质粒
【求助】【求助】将病毒载体感染细胞只有部分基因表达为什么,什么方法可以探究基因未表达的原因
子了。所以你可以看看以前用这个质粒包装的慢病毒的表达情况,然后和你的比较一下,看看是本身元件的问题还是你自己试验的问题。 2、病毒滴度:做病毒表达,必须考虑的问题一定是滴度有多大。滴度小了,表达自然会很小。3、不明白你做的是融合蛋白还是含有三种不同基因的三种慢病毒。如果是融合蛋白,那说明可能是做融合蛋白的元件搭配上出现问题。哪个在前或者哪个在后都会有影响。如果是三种不同的病毒,那可以先做一下单感染,看看表达。 j19s87x 有意加QQ:594051497讨论
27、问:我用的是胰腺癌细胞,转染试剂为Fugene6,表达质粒为pcDNA6(其中克隆有一蛋白的cDNA),筛选抗生素为Zeocin。我先尝试的是瞬时转染,48小时后western blot检测,目的蛋白得到过量表达,而且重复性也不错。接下来加入Zeocin做稳定筛选,大约10天后得到抗性细胞进行western blot检测,但结果是该蛋白没有过量表达。我已经重复了3次,都是这个结果。 答: 1。你的蛋白对细胞有毒性作用,因此长期筛选后,高表达的细胞通通死亡
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