- ￥1980
- Sino Biological
- 北京
- HG13739-ACGLN
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human EDDM3B Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：EDDM3B
反应种属：Human
应用说明：
cDNA描述：Full length Clone DNA of Homo sapiens epididymal protein 3B.
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文献和实验事项： 1.在慢病毒感染细胞前，为检测病毒上清培养液内病毒的活性，并确定病毒与转染细胞之间的比率，需要确定病毒的滴度。病毒的滴度可以通过转染Hela细胞，然后使用抗体筛选稳定的细胞转染株，进行计数和数值统计。 2. 在慢病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合，只有一些较小的慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。
以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293FT细胞。 1、取1.5 ml灭菌EP管，加入1.5 μg包装混合质粒和0.5 μg表达质粒以及250μl的无血清Opti MEM。轻柔混匀，室温孵育5 min。 2、取1.5 ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250 μl无血清Opti-MEM I培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。 3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20 min。 4、用胰酶消化并记数293
慢病毒包装简要程序： 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293FT细胞。 1、取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血清Opti MEM。轻柔混匀，室温孵育5min。 2、取1.5ml灭菌EP管，取9μl 脂质体2000l溶于250μl无血清Opti-MEM I培养基中。轻柔混匀，室温孵育5min。 3、将DNA溶液和脂质体溶液轻柔混匀。室温孵育20min 4、用胰酶
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