北京义翘神州 人酸性几丁质酶表达质粒 哺乳动物稳定瞬时表达 质粒表达

11个注意事项帮你搞定细胞转染

。整个实验操作流程提供长期稳定及规模可调的蛋白生产。与稳定基因表达相比，瞬时表达（TGE）主要适用于短期内制备重组蛋白，普健生物的瞬时表达使用悬浮细胞，能够完成mL到100L的体积的蛋白表达，一般在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择。 08转染效率监测 基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。 可以使用报告基因来确定优化条件，其表达蛋白易检测，在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶（CAT

细胞自噬发生与检测

蛋白转位至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色荧光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通过计数来评价自噬活性的高低。 mRFP-GFP-LC3 双荧光自噬指示体系： mRFP-GFP-LC3 融合蛋白的病毒产品 mRFP 用于标记及追踪 LC3，GFP 的减弱可指示溶酶体与自噬小体的融合形成自噬溶酶体。由于 GFP 荧光蛋白对酸性敏感(pH 敏感)，当自噬体与溶酶体融合后 GFP 荧光发生淬灭,而 mRFP 相对稳定，因此只能检测到红色荧光。 1. 哺乳动物 LC3 表达质粒

FASEB J：动物肠菌合成宿主神经活性 D 型氨基酸

含量的两种 D 型酸性氨基酸，它们可能也存在于其他 DAAO 酶标法阴性的样品中。 图 3：利用 LC-MS/MS 对 D 型氨基酸的主要生产菌株进行产物谱分析 综上，本研究建立了基于酶反应和手性 LC-MS/MS 的 D 型氨基酸分析方法，对大鼠肠道微生物纯培养菌株开展快速定量表征，在菌种和菌株水平揭示了 D 型氨基酸产物谱与合成能力的显著差异，表明了纯培养和代谢分析在肠菌来源活性分子研究中的必要性，为研究 D 型氨基酸在哺乳动物中的代谢规律和生理功能提供了方法和基础。