- ￥250 - 1500
- GBI
- 进口
- GB1001
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
1年
- 英文名：
Transfection Reagent
- 库存：
大量
- 供应商：
苏州神洲基因有限公司
- 保存条件：
-4C
- 规格：
250ul/500ul/1000ul/1500ul
| 规格： | 250ul | 产品价格： | ￥250 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ul | 产品价格： | ￥500 |
| 规格： | 1000ul | 产品价格： | ￥1000 |
| 规格： | 1500ul | 产品价格： | ￥1500 |
| GBfectene转染试剂操作流程图 |
特点： 1.转染效率高 2.蛋白表达水平高 3.毒性低，可用于原代细胞转染 4.操作简便，转染后无介质变化要求 注意事项： 1. 细胞的密度 转染时贴壁细胞的密度以70-80%为佳，而且转染时细胞应处在生长旺盛状态。细胞密度过高会影响转染效果。 2. 质粒DNA的质量 使用高纯度的质粒DNA也是转染试验中的关键因素。为了保证试验的最好结果，建议采用OD260/OD280在1.8左右，无蛋白、无RNA、无内毒素的DNA。 3. 血清的影响 在制备DNA/GBfectene-Elite复合体过程中不能添加血清，建议用无蛋白培养基（如DMEM或其它无蛋白培养基）稀释质粒和转染试剂，以达到复合物形成的最佳效果。但是，在随后的转染过程中，血清的存在并不影响DNA/GBfectene-Elite复合体的转染效果。 4. GBfectene-Elite的用量 对于一定量的DNA建议尝试4个不同剂量的GBfectene-Elite试剂进行优化实验，以确定最佳的转染效率。以24孔板为例，每0.5μg DNA可使用1.5μl、2.0μl、2.5μl和3.0μl GBfectene-Elite试剂作为初步实验条件。 |
操作流程：
| 以下操作步骤以24孔板为例，遵循以下操作方法可以高效地将DNA转染贴壁和悬浮培养的多种真核细胞。 |
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| A. 细胞铺板 | |
| 贴壁细胞数量：转染前的18-24个小时，在24孔板的每个孔中加入500 μl含有0.6-1.3 x 105个细胞的无抗生素生长培养基(确保转染时细胞密度在70-80%)。 | |
| 悬浮细胞数量：转染实验的当天，在24孔板的每个孔中加入500 μl含有1-2.5 x 105个细胞的无抗生素生长培养基。注意确保转染时细胞没有过度生长或处于休止期。 | |
| B. DNA/GBfectene-Elite转染复合物的制备 | |
| 1、将GBfectene-Elite转染试剂放置于室温中，使用前轻轻混匀。 2、将100 μl DMEM或其他培养液（无血清和无抗生素）加入无菌试管中。 3、在上述含有DMEM培养液的试管中加入0.5 μg 或1 μg待转染的DNA质粒等，并充分混匀。随后在管子中加入经优化实验得到的GBfectene-Elite 最佳用量（见下注解），快速涡旋混合使其完全混匀. 4、室温静置10分钟，从而获得100 μl DNA/GBfectene-Elite 转染复合物（注：该转染复合物在室温下可保质1 小时）。 |
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| C. 转染过程 | |
| 1、在每个细胞培养孔不同部位逐滴加入100 μl DNA/GBfectene-Elite的转染复合物（由步骤B制备所得），轻轻前后晃动培养板使其混匀。 2、放置在37 ℃，5%CO2培养箱中培养。 3、转染24-48小时后，收集细胞，并按要求进行检测。 |
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| 注解： GBfectene-Elite的用量： 对于一定量的DNA建议尝试4个不同剂量的GBfectene-Elite试剂进行优化实验，以确定最佳的转染效率。以24孔板为例，每0.5μg DNA可使用1.5μl、2.0μl、2.5μl和3.0μl GBfectene-Elite试剂作为初步实验条件。 |
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文献和实验病毒载体在生物医学的基础研究和产品开发中具有重要作用，细胞转染是制备病毒载体的关键步骤。然而现有转染试剂价格昂贵、操作繁琐，已成为快速、高效和大规模制备病毒载体的限制因素。QuickShuttle系列转染试剂是由北京康碧泉生物科技有限公司研发的一类具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂，具有高效、低毒和易于使用等优点。QuickShuttle区别于常规转染试剂的两个最主要特点是：（1）可以在细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作可在一分钟内完成
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