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- 2026年04月19日
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胞内钙离子信号检测
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斯高研究院
斯高专注以心脑血管为特色的生命科学领域科研设备的研发、生产、销售，与长期技术支持。设备销往全球400+实验室，助力用户产出多项前沿成果。获得国家专精特新“小巨人”、国家高新技术企业认证，河南省心脏电生理重点实验室等12个省级科研平台支撑。秉承“开放、共享、合作”理念，已为全球1000+实验室提供交流平台及技术服务。并持续自主创新，承担16项国家及省级重点科研项目。
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文献和实验Neuron：北大陈雷研究组报道胞内钙离子对 TRPC3/6 通道调控的机制
通道的负反馈调节。 TRPC 通道在跨膜区还具有激活型 Ca2+ 结合位点 CBS3。抑制型和激活型 Ca2+ 结合位点的作用相互叠加，导致了 TRPC 通道对胞内钙离子浓度复杂的响应。 而在 FSGS 患者中发现的 TRPC6 GOF 突变破坏了 TRPC6 胞质区的抑制性 CBS1 的功能，但不影响激活型 CBS3 的功能，从而使突变体通道在有 Ca2+ 流入的情况下发生正反馈而持续激活，肾脏足细胞 Ca2+ 离子过载，最终引发 FSGS 疾病的发生（图 1）。 此外，不同小分子抑制
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂，可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化，Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯，成为脂溶的Fluo-3留在细胞内，当Fluo-3与细胞内游离钙结合后，其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上，当用480nm波长激发时，其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下：1、钙荧光探针负载；取细胞悬液，加Fluo-3-Am至10μmol/L，置二氧化碳培养箱中孵育1h，其间轻微振荡3次。离心，去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
【求助】测定细胞内钙离子浓度都有哪些方法？ 参与者：junxia 想测定某一蛋白对细胞内钙离子浓度的影响。请教各位大虾都有哪些测定方法？好像常用的是共聚焦？除此之外呢？ 参与者：gzgygy 单个观察用confocal。 群体准确性最高的不是confocal而是流式。 参与者：jc_484190
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