- ￥50 - 1000
- xuanke
- 国产/进口
- XK-YDXB-2781
- 2025年12月29日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
47
- 细胞类型：
原代细胞
- 物种来源：
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
三．注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月；
2.在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作；
3.小鼠成骨细胞完全培养基只可用于科研。
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文献和实验指培养细胞时，具备可使其最大限度地生长和繁殖的条件，而含有满足各种营养缺陷突变型要求的培养基。其组成可按生物种类和目的而异，但一般是由酵母浸膏、麦芽汁、牛肉膏、蛋白胨、胰蛋白胨、酪蛋白氨基酸等营养物中选几种营养物配合而成。完全培养基用于短期内无性增殖大量细胞，以及分离和增殖营养缺陷突变型。
原代培养1.取新生3d以内BALB/c小鼠，断颈处死后立即投入75%酒精中消毒5min（虽有头部皮肤保护，但时间不要过长，所以事先要把准备工作做好之后再去杀老鼠）。2.D-Hank’s液漂洗后分离颅盖骨，刮除骨膜和结缔组织，DMEM清洗颅骨骨片并剪碎。（自我感觉碎一点好一些）3.加入0.25%胰蛋白酶（含0.02EDTA），37°恒温消化20min，吸出消化液，之后1mg/1mlI型胶原酶37°恒温消化20min后离心（1000r/min，5min），弃上清液。（消化时间自己摸索，之前我消化
“完全培养基” 指的是已经添加了各种添加物、含有培养基的所有成分、能够满足某种特定细胞生长所需的培养基。通常是使用限定成分的培养基来配置，一些不稳定的成分——如谷氨酰胺以及各种补充物、血清、生长因子或激素，都在临用前加入。 限定成分的培养基品种繁多，从简单的仅含有必需氨基酸、维生素、无机盐的 Eagle's MEM，到复杂的 M199、F12 等，这些都可被用作一种基础培养基，添加各种不同的特殊物质，以满足许多不同类型细胞的需求。
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