- ￥1500
- 普诺赛
- CL-0604
- 武汉
- 2026年01月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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充足
- 供应商：
武汉益普生物科技有限公司
- 英文名：
B82 (Hamprecht); B-82; GM00347; GM-347; GM0347; GM347; GM00347A
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 产品名称 | B82 (小鼠肿瘤细胞系) (种属鉴定正确) |
| 别称 | B82 (Hamprecht); B-82; GM00347; GM-347; GM0347; GM347; GM00347A |
| 货号 | CL-0604 |
| 规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
| 种属 | 小鼠 |
| 年龄（性别） | 雄性；100日龄 |
| 组织来源 | 组织：皮下结缔组织；疏松结缔组织及脂肪；品系：C3H/An |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 背景描述 | B82细胞是L-929细胞系通过在BUdR中逐渐选择所获得的衍生株。具有70-80%的克隆形成能力，可用于染色体分析和遗传杂交研究。 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 培养方案A （默认） |
生长培养基：MEM(含NEAA)+10%FBS+1%P/S 培养气相：空气，95%；CO₂，5% |
| 冻存条件 |
冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:5 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
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文献和实验sunyong_97 ① 证明A对B具有具有调控（上调）作用。 ② 构建B全长及系列缺失载体，寻找顺式反应元件。 ③ EMSA实验确定与顺式反应元件相结合的转录因子。 ④ 若转录因子为已知蛋白，通过CHIP实验在体内验证转录因子与顺式反应元件相结合。 ⑤ 通过RNA干扰与过表达转录因子进一步验证其对B表达的影响。(实验至此可结束) ⑥ 若转录因子为未知蛋白，上接步骤③，进行蛋白质谱分析、氨基酸测序、分子
基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增，电泳确认 PCR 产物大小，对大小正确的产物进行测序，如测序结果与理论序列一致，则确认该基因编辑小鼠模型为正确重组模型。 TIPS 双臂 PCR 产物需测通：我们在实践中发现，即使 Donor 序列完全正确，部分鼠会存在突变或片段缺失的情况，我们推测是细胞在 Donor 重组前或过程中对 Donor 发生了编辑或重组后结构不稳定等原因所致，所以只对 Donor 各个部分接头测序是不严谨的，建议测通。 下面以 CKO 模型鉴定为例说明双臂 PCR 鉴定
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都显示出正确的甲基化，这表明编辑过的甲基化标记遗传给了发育完全的生物体，这对支持足月单性生殖发育至关重要。 与此相反，对两只出生后 24 小时内死亡的孤雌生殖小鼠的尾部组织进行亚硫酸氢盐测序却发现，在 7 个 ICRs 至少存在一个甲基化印迹丢失。因此，这些数据也证实了所有 7 个 ICRs 的编辑对孤雌生殖小鼠胚胎的足月发育是必要的。 图片来源：PNAS 结语 综上所述，本研究证实，尽管说父系和母系基因组之间的印迹介导的平衡对哺乳动物的发育至关重要，但仍然可以通过适当地改造
