一步法DNA扩增试剂盒 

 一步法DNA扩增试剂盒 
产品说明
本产品直接以血液为模板，用抗抑制的2×Direct PCR Master Mix 进行扩增，扩增产物直接通过电泳检测。
产品特点
1.简便：无需事先对血样进行提纯，直接用血液为模板扩增目的基因；
2.高效：多数抗凝剂存在条件下，超强的抗抑制能力，能有效扩增杂质较多的模板。
适用范围
1. EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝方法保存的新鲜或冷冻血样；
2. 未加抗凝剂的血样和干血；
3. 血液基因组的扩增检测。
 
产品介绍
本试剂盒以血液为模板直接进行DNA扩增，扩增产物可直接点样电泳。该试剂盒中含有最新设计的Taq酶突变体，这些使它能够耐受全血样品中存在的抑制剂。在大多数抗凝剂存在下，包括肝素、柠檬酸和EDTA等，Taq酶依然扩增性能良好。由于其可以从血液直接进行扩增，免除了繁琐的DNA提取步骤，加快了工作流程，降低了污染的风险。
 
产品特点
1. 简便：无需事先对血液进行提纯，直接用血液为模板扩增目的基因；
2. 高效：多数抗凝剂存在条件下，超强的抗抑制能力，能有效扩增杂质较多的模板。
 
产品用途
1.未加抗凝剂的血液样本；
2.添加了肝素、柠檬酸、EDTA 等抗凝剂的血液样本；
3.血液基因组扩增检测。
 
使用建议
1.使用时添加≤10%的全血为模板，若扩增不出目的条带， 酶量可加倍。加上血液后将管中各组分轻轻混匀。
2.2mM Mg2+可以满足绝大多数 PCR 扩增，对于某些 PCR， 为了保证较好的扩增，可调
节为 2-5mM。
 
保存温度
   -20℃保存。
 
产品组分

产品组成	体积
2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+）	1.25ml
dNTPs（各 10mM）	100μl
Direct Taq DNA 聚合酶（400U）	100μl

 
 
 
 
使用方法
 常用反应体系 (25μl):

2 × Direct Blood PCR Buffer （with Mg2+*）	10μl
上游引物	0.2-1.0 μM（终浓度）
下游引物	0.2-1.0 μM （终浓度）
dNTPs（各10mM）	1μl
全血	0.1-2.5μl
Direct Taq DNA 聚合酶（400U）	1μl
ddH2O	至 25 μl

*Mg²⁺终浓度为 3.5mM
 
常用PCR设置

当扩增片段＜3K	当扩增片≥（推荐引物长度≥30bp）
94℃， 1 分钟 30 秒 94℃，20 秒              55-60℃，20 秒         30-40循环 72℃，1kb/60 秒 72℃ 5 分钟 4℃ 保温	94℃， 5 分钟 94℃，15 秒            30-40循环           68℃，1kb/60 秒     72℃ 5 分钟 4℃ 保温