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PMA(叠氮溴化丙锭)
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100
PMA
/
1年
优利科(上海)生命科学有限公司
4℃避光保存
1mg
PMA(叠氮溴化丙锭)产品规格: 1mg应用范围:细菌核酸染色储存条件:4℃避光保存,有效期见外包装。产品介绍
PMA是一种高亲和性的DNA结合染料,该染料本身具有微弱的荧光,但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。它尤其与双链DNA具有高亲和性。PMA不具有细胞膜渗透性,因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的 DNA。PMA修饰的DNA经蓝光(~464 nm)光解后,PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基,与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键,从而导致永久性 DNA 修饰(图1)。该修饰过程会使DNA不溶,并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失,进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增。残留在溶液中未结合的PMA,在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物,使羟胺不再能够共价结合DNA,从而不影响PCR扩增。这个特性使得 PMA 可以通过实时定量 PCR(qPCR)的手段,检测多种样本类型包括:细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞;与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合,广泛应用在食品和水安全和环境测试中。
使用前注意事项 1. PMA 根据细胞膜通透性区分死菌和活菌。许多杀死细菌的方法会导致细胞膜受损,因此适用于 PMA 检测。 但有些方法, 如紫外线照射,可能不会立即导致细胞膜破裂。 因此,在选择 PMA 检测之前,需先进行文献检索和预实验确定是否适用于 您选择的细菌类型和杀伤方法。2. PMA 处理完细菌后需要进行光解,以使染料与死细胞 DNA 共价结合。 注:光解操作可以使用蓝色或白色光源。一般来说,灯越亮,光解步骤的效率就越高。非 LED 灯(如卤素灯)可能会加热 您的样本并对分析产生负面影响,照射时需要使用冰块对样品降温处理。3. 样本可以在光解后冷冻保存。若在进行 PMA 处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果。如需在检测之 前冷冻样本,建议先进行预实验。4. PMA 的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除 PMA 共价修饰的 DNA;因此,在提取基因组 DNA 时,需使用相同体积 的基因组 DNA 洗脱液,进行体积归一化处理。阳性对照可以使用活细胞的基因组 DNA。5. 为了验证 PMA 在测试样本中的有效性,可对比同处理样本-/+PMA 之间的 Ct (dCt)变化。
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。2. 试剂盒组分中含有荧光染料,使用及保存过程中注意避光。3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。4.产品仅供科研。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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85 人阅读发布时间:2022-05-07 18:51
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