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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
GelstainRed TM
- 保质期:
10年
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件:
室温避光保存
- 规格:
0.1 mL/0.5 mL
| 规格: | 0.1 mL | 产品价格: | ¥172.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5 mL | 产品价格: | ¥553.0 |
产品名称:GelstainRedTM 核酸染料, 10,000× in water
产品规格:0.1 mL/0.5 mL
产品应用方向:核酸凝胶电泳中核酸样品染色
产品保存条件:室温避光保存,有效期见外包装
产品运输条件:常温
保质期(月):120
产品介绍:
GelstainRed TM 是一种高灵敏、无致突变性超安全和超稳定的荧光核酸凝胶染色试剂(在工作浓度中)。它可替代溴化乙锭(EtBr,EB),具有远高于 EB 的灵敏度,同时不需要脱色。GelstainRed TM 和 EB 有相同的光谱特性,它替代 EB 不需要更换成像系统。
使用方法:
1. 胶染法(用法同 EB)(1)制胶时每 50 mL 琼脂糖凝胶中加入 5 μL GelstainRedTM 核酸染料,并充分混匀。(GelstainRedTM具有出色的热稳定性,可将试剂直接加入高温的凝胶溶液中,无需等待凝胶溶液冷却后再加入。也可采用将 GelstainRedTM 预先与含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液混合,加热制成。)(2)按照常规方法进行电泳。 2. 泡染法(1)按照常规方法进行电泳。(2)使用 3×工作液染色,即将 GelstainRedTM 10,000×储液稀释约 3,300 倍到 0.1 M NaCl 水溶液中。(例如若需要配置 50 mL 泡染液,则需要将 15 μL GelstainRedTM 10,000×储液和 5 mL 1 M NaCl 加到 45 mL H2O 中。)(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,加入足量的 3×染色液浸没凝胶,为了缩短泡染时间,染色液可以预先加热至 70℃左右,然后放入凝胶,孵育 10 min 即可获得理想效果(若不加热,室温摇床孵育 30 min 即可,若为丙烯-酰胺凝胶,则需孵育 30 min 到 1 h,并随丙烯-酰胺含量增加而延长)。泡染染料用量较多,单次使用的染色液可重复使用 3 次左右。3×GelstainRedTM 染色液可以大量制备,在室温下保存直至用完。
注:
如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。
如果泡染染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间以保证边缘清晰或改进上样技巧。
注意事项:
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. TAE 和 TBE 导电性能存在差异,如需缩短电泳时间,可选用 TAE电泳缓冲液。
3. 染料无需低温冷藏,请于室温下储存,以避免沉淀,若发现沉淀,请将染料加热至45-50℃,2 min,振荡溶解,不影响使用效果。
4. 本产品可以用来染色单链DNA 和 RNA,但它对单链DNA 或 RNA 的灵敏度低于双链DNA。
常见问题解答:
DNA条带迁移率受到影响?
1.为安全而设计的分子量较大的高效亲和型染料,在凝胶电泳中它们会影响DNA的迁移,建议用泡染法(后染)代替胶染法(前染)。
2.高分子量的DNA在低百分比的琼脂糖凝胶中的分离效果比较好,建议制百分比浓度小的琼脂糖凝胶。
3.TBE缓冲液的缓冲能力比TAE缓冲液的效果更好,建议更换电泳缓冲液。
为什么我看到的荧光弱,时间久了染料性能会降低,或者后染染色后有一层染料在胶上?
1. 染料可能从溶液中沉淀出来,建议将溶液加热至45-50℃,保持2分钟,然后涡旋溶解。后期在室温下储存染料以避免沉淀。
2. 凝胶的高背景染色可能是琼脂糖质量较差,琼脂糖中的污染物可能与染料结合,导致背景增加。
用哪些仪器检测?
Super Page GelstainRed可以用紫外透射仪(254nm) GelstainRed完美兼容标准紫外透射成像仪(302或312nm)。 Gelblue兼容紫外和蓝光,蓝光较优。
后染法染色液可以重复使用吗?
可以。但是,如果灵敏度降低,请使用新鲜的染料溶液。
是否与克隆、连接和测序等下游应用兼容?
是。
我应该在我的6×DNA loading buffer中加入多少染料 ?
不建议将染料直接添加到上样缓冲液中,因为这会导致条带迁移不准确。 公司提供6×GelstainRed Prestain上样缓冲液(S2006)产品,可以直接使用,若需要精确确定DNA大小,建议使用后染法。
检测下限是多少?
能够检测至少1 ng DNA的条带。 但是,染色的灵敏度取决于仪器功能和曝光设置。
前染胶是否可以重复电泳?
不建议,信号会随着后续电泳减弱。
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