图 1. 在 1 × TBE 中分别用 GelRed 和 EB 预制 1% 琼脂糖凝胶中 1Kb Plus DNA Ladder 稀释物的电泳图。从左至右各泳道 DNA 总量分别为 : 200 ng , 100 ng , 50 ng and 25 ng 。凝胶用 300nm 透视器显像,用 EB 滤光片和 Polaroid 667 黑白胶片拍照。
目前大多数商业化的核酸染料(凝胶染色试剂)总是在安全性、稳定性和灵敏性等方面不完全令人满意。例如,虽然 EB (溴化乙啶)作为目前使用最广泛的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背 景荧光信号(如图1)。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。 SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料 ,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。
至于国内有公司宣称的新产品Goldview,我们不想多加评论。因为从极为相似的对比试验结果来看,该产品似乎就是AO(丫啶橙 ,一种剧毒产品,且荧光亮度不佳)。请看Goldview 与 AO 对比试验结果(其中Goldview是从国内某公司采购,AO则来自SIGMA,报告来自开放生物)