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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
23
- 英文名:
C58C1 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*10
产品名称:C58C1 电击感受态细胞50ul*10
规格:50ul*10
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
C58C1 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
C58C1 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
C58C1 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2水飞蓟素Silymarin质量规格:水飞蓟素UV 80%;双宾30%
HDBEC-c 人类皮肤血内皮细胞(HDBEC)来自少年者 500,000cells 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铁蛋白Ferritin质量规格:BR,20%水溶液
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)鹅去氧胆酸(标准品)Chenodeoxycholic acid质量规格:HPLC>97%,标准品
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 鹅去氧胆酸Chenodeoxycholic acid质量规格:>98%
Mv 1 lu 貂肺上皮细胞胰岛素(牛)INSULIN质量规格:BR,27U/mg,进分
CD40LG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)苍耳亭(标准品) Xanthatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支气管上皮细胞系 HumanPR171关键中间体I PR171 intermedaite I质量规格:>97%
人成纤维细胞总RNAHMF NAL-甘-异白二肽,甘氨酰-L-异亮氨酸Benzyl bromide 质量规格:>98%,BR
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人细胞裂解液 (阳性对照) PR171关键中间体IIPR171 intermedaite II质量规格:>97%
狗肾细胞隆突型;MDCK superdomePR171关键中间体III(alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine质量规格:>97%
托伐普坦 Tolvaptan 质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T
磺胺噻唑 Sulfathiazole 质量规格:>99%,BR 大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP aibody)免疫试剂盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit
磺胺噻唑(标准品) Sulfathiazole 质量规格:含量测定 大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)免疫试剂盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit
环苯扎林盐酸盐 Cyclobenzaprine HCl 质量规格:>99%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T
盐酸美托咪定 Medetomidine HCl 质量规格:≥99.0%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)免疫试剂盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit
京尼平甙(标准品) Geniposide 质量规格:HPLC≥98%, 标准品 大鼠髓样细胞触发性受体2(EM2)免疫试剂盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit
京尼平甙 Geniposide 质量规格:>98%,BR 大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit
甲睾酮; 甲基素 17-Methyltestosterone 质量规格:>98%,BR 大鼠羧甲基赖氨酸(CML)免疫试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit
四氢生物蝶呤游离碱 Tetrahydro-L-Biopterin free base 质量规格:>99% 大鼠胎盘生长因子(PLGF)免疫试剂盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit
盐酸替罗非班 Tirofiban HCl 质量规格:>99%,一水物,BR 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA检测试剂盒Ratglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
C58C1 电击感受态细胞50ul*10大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)免疫试剂盒 Rat myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit 槲皮素(标准品) Quercetin 质量规格:HPLC>98.0%,标准品
大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgG 96T/48T 托伐普坦 Tolvaptan 质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养
大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP aibody)免疫试剂盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit 磺胺噻唑 Sulfathiazole 质量规格:>99%,BR
大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)免疫试剂盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit 磺胺噻唑(标准品) Sulfathiazole 质量规格:含量测定
大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1 96T/48T 环苯扎林盐酸盐 Cyclobenzaprine HCl 质量规格:>99%,BR
大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)免疫试剂盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit 盐酸美托咪定 Medetomidine HCl 质量规格:≥99.0%,BR
大鼠髓样细胞触发性受体2(EM2)免疫试剂盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit 京尼平甙(标准品) Geniposide 质量规格:HPLC≥98%, 标准品
大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit 京尼平甙 Geniposide 质量规格:>98%,BR
大鼠羧甲基赖氨酸(CML)免疫试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit 甲睾酮; 甲基素 17-Methyltestosterone 质量规格:>98%,BR
大鼠胎盘生长因子(PLGF)免疫试剂盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit 四氢生物蝶呤游离碱 Tetrahydro-L-Biopterin free base 质量规格:>99%
规格:50ul*10
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
C58C1 电击感受态细胞50ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
C58C1 电击感受态细胞50ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
C58C1 电击感受态细胞50ul*10操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
SP2/0(小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2水飞蓟素Silymarin质量规格:水飞蓟素UV 80%;双宾30%
HDBEC-c 人类皮肤血内皮细胞(HDBEC)来自少年者 500,000cells 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铁蛋白Ferritin质量规格:BR,20%水溶液
心肌成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)鹅去氧胆酸(标准品)Chenodeoxycholic acid质量规格:HPLC>97%,标准品
CD86 Others Rat 大鼠 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 鹅去氧胆酸Chenodeoxycholic acid质量规格:>98%
Mv 1 lu 貂肺上皮细胞胰岛素(牛)INSULIN质量规格:BR,27U/mg,进分
CD40LG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)苍耳亭(标准品) Xanthatin质量规格:HPLC≥98%,标准品
人视网膜内皮细胞 (HREC)( 5×105 ) HBE, 正常人支气管上皮细胞系 HumanPR171关键中间体I PR171 intermedaite I质量规格:>97%
人成纤维细胞总RNAHMF NAL-甘-异白二肽,甘氨酰-L-异亮氨酸Benzyl bromide 质量规格:>98%,BR
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人细胞裂解液 (阳性对照) PR171关键中间体IIPR171 intermedaite II质量规格:>97%
狗肾细胞隆突型;MDCK superdomePR171关键中间体III(alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine质量规格:>97%
托伐普坦 Tolvaptan 质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAkit 96T/48T
磺胺噻唑 Sulfathiazole 质量规格:>99%,BR 大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP aibody)免疫试剂盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit
磺胺噻唑(标准品) Sulfathiazole 质量规格:含量测定 大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)免疫试剂盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit
环苯扎林盐酸盐 Cyclobenzaprine HCl 质量规格:>99%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T
盐酸美托咪定 Medetomidine HCl 质量规格:≥99.0%,BR 大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)免疫试剂盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit
京尼平甙(标准品) Geniposide 质量规格:HPLC≥98%, 标准品 大鼠髓样细胞触发性受体2(EM2)免疫试剂盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit
京尼平甙 Geniposide 质量规格:>98%,BR 大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit
甲睾酮; 甲基素 17-Methyltestosterone 质量规格:>98%,BR 大鼠羧甲基赖氨酸(CML)免疫试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit
四氢生物蝶呤游离碱 Tetrahydro-L-Biopterin free base 质量规格:>99% 大鼠胎盘生长因子(PLGF)免疫试剂盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit
盐酸替罗非班 Tirofiban HCl 质量规格:>99%,一水物,BR 大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA检测试剂盒Ratglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T
C58C1 电击感受态细胞50ul*10大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)免疫试剂盒 Rat myeloperoxidase-aineuophil cytoplasmic aibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA kit 槲皮素(标准品) Quercetin 质量规格:HPLC>98.0%,标准品
大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA检测试剂盒Ratmyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgG 96T/48T 托伐普坦 Tolvaptan 质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养
大鼠髓鞘碱性蛋白抗体(MBP aibody)免疫试剂盒 Rat myelin basic protein aibody,MBP aibody ELISA Kit 磺胺噻唑 Sulfathiazole 质量规格:>99%,BR
大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)免疫试剂盒 Rat myelin-associated glycoprotein,MAG ELISA Kit 磺胺噻唑(标准品) Sulfathiazole 质量规格:含量测定
大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒RatiggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1 96T/48T 环苯扎林盐酸盐 Cyclobenzaprine HCl 质量规格:>99%,BR
大鼠髓系细胞触发受体-1(EM-1)免疫试剂盒 Rat iggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1,EM-1 ELISA Kit 盐酸美托咪定 Medetomidine HCl 质量规格:≥99.0%,BR
大鼠髓样细胞触发性受体2(EM2)免疫试剂盒 Rat iggering receptor expressed on myeloid cells 2,EM2 ELISA kit 京尼平甙(标准品) Geniposide 质量规格:HPLC≥98%, 标准品
大鼠羧化不全骨钙素(ucOC)免疫试剂盒 Rat Undercarboxylated Osteocalcin,ucOC ELISA Kit 京尼平甙 Geniposide 质量规格:>98%,BR
大鼠羧甲基赖氨酸(CML)免疫试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit 甲睾酮; 甲基素 17-Methyltestosterone 质量规格:>98%,BR
大鼠胎盘生长因子(PLGF)免疫试剂盒 Rat placea growth factor,PLGF ELISA kit 四氢生物蝶呤游离碱 Tetrahydro-L-Biopterin free base 质量规格:>99%
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