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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
44
- 英文名：
XL1-Blue MRF`Kan 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| XL1-Blue MRF`Kan 感受态细胞100ul*50 | 100ul*50 | 克隆感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
GBP1 Others Human 人 GBP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 增甘1(>97.0%(T))Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)质量规格：>97.0%(T)
木瓜蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mLN-甲基亚氨二乙酸(>98.0%(GC)(T))N-Methyliminodiacetic Acid质量规格：>98.0%(GC)(T)
PC9-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人肺癌细胞 PC9-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human lung cancer cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin氮基三乙酸二钠盐(>99.0%(T))Nitrilotriacetic Acid Disodium Salt质量规格：>99.0%(T)
IL32 Protein Human 重组人 Ierleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 标签)N-(2-羧乙基)亚氨基二乙酸(>98.0%(T))N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acid质量规格：>98.0%(T)
人结肠平滑肌细胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞 Rattus三乙四胺-N,N,N',N'',N''',N'''-六乙酸(>98.0%(T))Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic Acid质量规格：>98.0%(T)
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶K(进分)Proteinase K质量规格：≥30units/mg protein,sigma分装
CM-H025人胰腺上皮细胞完全培养基100mL蛋白酶K(Sigma)Proteinase K质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装
HuTu-80细胞，人十二指肠腺癌细胞 人色素瘤细胞,HME2细胞 人肝永生化细胞;THLE-3胰凝乳蛋白酶抑制剂Chymostatin质量规格：进分
H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞) 5×106cells/瓶×2亮抑蛋白酶肽(进口)Leupeptin 质量规格：≥95%,进口半硫酸盐
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制剂Pepstatin A microbial质量规格：≥90%,进分
长春西汀 HPLC≥98% 20mg AKT蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5
长春新碱 HPLC≥98% 20mg AMCA蛋白标记试剂盒3(200微克/)
长春质碱 HPLC≥98% 20mg AMPKELISA试剂盒鱼0酸化腺苷酸活化蛋白激酶规格：96T/48T
长梗秦艽酮 HPLC≥98% 20mg ANDROGEECEPTOR蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
常春藤苷C HPLC≥98% 20mg ANDROGEECEPTOR蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5
常春藤苷D HPLC≥98% 20mg AnnexinV(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
常春藤苷H HPLC≥98% 5mg ANNEXINV-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒10/20
常春藤皂苷B HPLC≥98% 20mg APATHY封片液10毫升
常春藤皂苷元 HPLC≥98% 20mg APC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
常春藤皂苷元OβD葡萄糖酯苷 HPLC≥98% 20mg APC蛋白标记试剂盒1(1毫克/)
XL1-Blue MRF`Kan 感受态细胞100ul*50AKT蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5 长春西汀 HPLC≥98% 20mg
AMCA蛋白标记试剂盒3(200微克/) 长春新碱 HPLC≥98% 20mg
AMPKELISA试剂盒鱼0酸化腺苷酸活化蛋白激酶规格：96T/48T 长春质碱 HPLC≥98% 20mg
ANDROGEECEPTOR蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 长梗秦艽酮 HPLC≥98% 20mg
ANDROGEECEPTOR蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5 常春藤苷C HPLC≥98% 20mg
AnnexinV(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 常春藤苷D HPLC≥98% 20mg
ANNEXINV-FITC标记法细胞凋亡检测试剂盒10/20 常春藤苷H HPLC≥98% 5mg
APATHY封片液10毫升 常春藤皂苷B HPLC≥98% 20mg
APC(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 常春藤皂苷元 HPLC≥98% 20mg
APC蛋白标记试剂盒1(1毫克/) 常春藤皂苷元OβD葡萄糖酯苷 HPLC≥98% 20mg
XL1-Blue MRF`Kan 感受态细胞100ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
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文献和实验的ElectroTen-Blue®电转化感受态细胞，单次反应包装的SoloPack® Gold，以及XL2-Blue MRF´ ，XL1-Blue MRF´ Kan（四环素抗性质粒），XL1-Blue MR（没有F´附加体），克隆有二级结构的SURE细胞等。重点推荐 Stratagene的ElectroTen-Blue（转化效率>3×1010 ）和Novagen的Nova XG Zappers（转化效率>1×1010 ）电转化感受态细胞均具有endA－基因型，保证质粒优质高产；recA－重组缺陷基因型适合
plates（至少用前24 小时倒好），用前在37℃培养箱中烘烤1-2 小时以去除水滴。 2. 将过夜培养的XL1-blue MRF’细菌2000 转/分，离心10 分钟，将细菌溶解在10mM MgSO4 中，调整细菌浓度为OD600=0.5。 3. 融化NZY top，并将NZY top 放在50℃水浴中。 4. 将适量的XL1-blue MRF’细菌溶液与一定稀释度的phage 文库混合，37℃下共同作用15 分钟。 直径
Single Clone Excision Protocol
. 4.In a 15 ml conical tube,place 200 ml XL1-Blue MRF' cells (at A600 of 1.0; if absorbance differs,adjust amount proportionally) 250 ml of phage stock (from step 1 above.Make sure that you don't transfer chloroform from the bottom of the tube). 1 ml
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