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- 详细信息
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- 技术资料
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41
- 英文名：
DH10Bac 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
产品名称：DH10Bac 感受态细胞100ul*50
规格：100ul*50
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
DH10Bac 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
DH10Bac 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
DH10Bac 感受态细胞100ul*50操作说明：
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙醇充分挥发，
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬（标准品）Indobufen质量规格：含量测定
人淋巴内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶（标准品）Triprolidine hydrochloride质量规格：含量测定
HS-1细胞，人皮肤癌细胞系 滑念珠菌 小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格：>98%,标准品
CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸（标准品）Azelaic acid质量规格：检查
MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780（培哚普利拉）（标准品）Perindoprilat质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格：BR,>98%
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格：≥99%,BR
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格：>98%,二醋酸盐
A549, 人肺癌细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格：BR,>98%
NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格：BR,>98%
抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂) Aprotinin 质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰 人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒 Human MCP-3 ELISA kit
E-64,蛋白酶抑制剂 E64 质量规格：>98%,BR 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒 Human MCP-4 ELISA kit
阿齐沙坦酯 Azilsartan Medoxomil 质量规格：>98%,BR 人单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)免疫试剂盒 Human LIMK1 ELISA Kit
α-淀粉酶 α-Amylase 质量规格：BR，4000u/g 人胆(CH)免疫试剂盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit
α-糜蛋白酶 Chymotrypsin 质量规格：1500USP u/mg,猪源 人胆7α-羟化酶(CYP7A)免疫试剂盒 Human CYP7A ELISA Kit
乙酰辅酶A三锂盐 Acetyl coenzyme A trilithium salt 质量规格：95%,美国进口原装 人胆酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Human CETP ELISA Kit
尿素酶,脲酶(巨豆) Urease 质量规格：>45 U/mg,进分 人胆红素氧化代谢物 免疫试剂盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
蛋白酶VIII Protease type VIII 质量规格：美国原装进口7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌 人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA检测试剂盒Humancholineacetylase,CHAcELISAKit 96T/48T
曲安奈德 Triamcinolone Acetonide 质量规格：>98%,BR 人胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫试剂盒 Human ChAT ELISA Kit
曲安奈德(标准品) Triamcinolone Acetonide 质量规格：>98%,标准品 人胆碱转运体样蛋白4(SLC44A4)免疫试剂盒 Human Choline anspoer-like protein 4,SLC44A4 ELISA kit
DH10Bac 感受态细胞100ul*50人单疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)免疫试剂盒 Human Herpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA Kit 溶菌酶(蛋清) Lysozyme,from egg white 质量规格：2万U/mg,分子生物学级
人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒 Human MCP-1 ELISA kit HRP;辣根过氧化物酶 Peroxidase, Horseradish(HRP) 质量规格：BR,RZ>2.5,活性>250U/mg
人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫试剂盒 Human MCP-2 ELISA kit 透明质酸酶 Hyaluronidase 质量规格：≥500IU/mg,BR,牛源提取
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒 Human MCP-3 ELISA kit 抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂) Aprotinin 质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒 Human MCP-4 ELISA kit E-64,蛋白酶抑制剂 E64 质量规格：>98%,BR
人单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)免疫试剂盒 Human LIMK1 ELISA Kit 阿齐沙坦酯 Azilsartan Medoxomil 质量规格：>98%,BR
人胆(CH)免疫试剂盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit α-淀粉酶 α-Amylase 质量规格：BR，4000u/g
人胆7α-羟化酶(CYP7A)免疫试剂盒 Human CYP7A ELISA Kit α-糜蛋白酶 Chymotrypsin 质量规格：1500USP u/mg,猪源
人胆酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Human CETP ELISA Kit 乙酰辅酶A三锂盐 Acetyl coenzyme A trilithium salt 质量规格：95%,美国进口原装
人胆红素氧化代谢物 免疫试剂盒 Human Biopyrrin ELISA Kit 尿素酶,脲酶(巨豆) Urease 质量规格：>45 U/mg,进分
规格：100ul*50
分类：克隆感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
DH10Bac 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
DH10Bac 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
DH10Bac 感受态细胞100ul*50操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬（标准品）Indobufen质量规格：含量测定
人淋巴内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶（标准品）Triprolidine hydrochloride质量规格：含量测定
HS-1细胞，人皮肤癌细胞系 滑念珠菌 小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格：>98%,标准品
CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸（标准品）Azelaic acid质量规格：检查
MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780（培哚普利拉）（标准品）Perindoprilat质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格：BR,>98%
小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格：≥99%,BR
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格：>98%,二醋酸盐
A549, 人肺癌细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格：BR,>98%
NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格：BR,>98%
抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂) Aprotinin 质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰 人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒 Human MCP-3 ELISA kit
E-64,蛋白酶抑制剂 E64 质量规格：>98%,BR 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒 Human MCP-4 ELISA kit
阿齐沙坦酯 Azilsartan Medoxomil 质量规格：>98%,BR 人单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)免疫试剂盒 Human LIMK1 ELISA Kit
α-淀粉酶 α-Amylase 质量规格：BR，4000u/g 人胆(CH)免疫试剂盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit
α-糜蛋白酶 Chymotrypsin 质量规格：1500USP u/mg,猪源 人胆7α-羟化酶(CYP7A)免疫试剂盒 Human CYP7A ELISA Kit
乙酰辅酶A三锂盐 Acetyl coenzyme A trilithium salt 质量规格：95%,美国进口原装 人胆酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Human CETP ELISA Kit
尿素酶,脲酶(巨豆) Urease 质量规格：>45 U/mg,进分 人胆红素氧化代谢物 免疫试剂盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
蛋白酶VIII Protease type VIII 质量规格：美国原装进口7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌 人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA检测试剂盒Humancholineacetylase,CHAcELISAKit 96T/48T
曲安奈德 Triamcinolone Acetonide 质量规格：>98%,BR 人胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫试剂盒 Human ChAT ELISA Kit
曲安奈德(标准品) Triamcinolone Acetonide 质量规格：>98%,标准品 人胆碱转运体样蛋白4(SLC44A4)免疫试剂盒 Human Choline anspoer-like protein 4,SLC44A4 ELISA kit
DH10Bac 感受态细胞100ul*50人单疱疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)免疫试剂盒 Human Herpes simplex virus,HSV-Ag1 ELISA Kit 溶菌酶(蛋清) Lysozyme,from egg white 质量规格：2万U/mg,分子生物学级
人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒 Human MCP-1 ELISA kit HRP;辣根过氧化物酶 Peroxidase, Horseradish(HRP) 质量规格：BR,RZ>2.5,活性>250U/mg
人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫试剂盒 Human MCP-2 ELISA kit 透明质酸酶 Hyaluronidase 质量规格：≥500IU/mg,BR,牛源提取
人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒 Human MCP-3 ELISA kit 抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂) Aprotinin 质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫试剂盒 Human MCP-4 ELISA kit E-64,蛋白酶抑制剂 E64 质量规格：>98%,BR
人单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)免疫试剂盒 Human LIMK1 ELISA Kit 阿齐沙坦酯 Azilsartan Medoxomil 质量规格：>98%,BR
人胆(CH)免疫试剂盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit α-淀粉酶 α-Amylase 质量规格：BR，4000u/g
人胆7α-羟化酶(CYP7A)免疫试剂盒 Human CYP7A ELISA Kit α-糜蛋白酶 Chymotrypsin 质量规格：1500USP u/mg,猪源
人胆酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Human CETP ELISA Kit 乙酰辅酶A三锂盐 Acetyl coenzyme A trilithium salt 质量规格：95%,美国进口原装
人胆红素氧化代谢物 免疫试剂盒 Human Biopyrrin ELISA Kit 尿素酶,脲酶(巨豆) Urease 质量规格：>45 U/mg,进分
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ws 各位站友，本人因克隆某个植物抗病基因而完成了其BAC文库，目前正在做图位克隆的工作。 但文库的完成耗费了大量人力、物力和财力，因此想请教下该库还有什么其它用途。或与其 它技术结合，可开展什么工作。 谢谢了。。。。 zhujoker BAC (Bacterial Artificial Chromosome, 细菌人工染色体)文库是进行全基因组测序、构建物理图谱、染色体步
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