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零下80度
- 保质期：
1年
- 英文名：
DB3.1Chemically Competent Cell
- 库存：
1000只
- 供应商：
上海淳麦
- 规格：
20*100ul
Rosetta-gami B(DE3)
Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell
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Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞基因型：
F- ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pRARE (Camr, Kanr, Tetr)
Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞简要说明：
Rosetta-gami B(DE3) 菌株聚合了 BL21，Tuner，Origami 和 Rosetta 四种菌株的优点： --＊ lacY1 基因 (半乳糖苷透性酶基因)突变赋予其 Tuner 菌株的优点——IPTG 以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个 细胞，产生更加严格、均一的浓度依赖。--
＊ pRARE 赋予其 Rosetta 菌株的优点——补充大肠杆菌缺乏的 6 种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA) 对应的 tRNA，提高外源基因的表达水平。--
* gor522::Tn10 trxB 赋予其 Origami 菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷 胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的 含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性。 --
＊ 该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区 (DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶)适合 T7 启动子诱导的蛋白表达。
＊ --Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有卡那霉素，氯霉素，四环素抗性，由特殊工艺制作，经 pUC19 质粒 检测转化效率高达 108 cfu/μg DNA。
Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞操作说明:
1. Rosetta-gamiB(DE3)菌株感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5 分钟后待菌块融化，加入目的 DNA 并用手 拨打 EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置 25 分钟。--
2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。--
3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分钟。--
4. 5000rpm 离心一分钟收菌，，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含 34 µg/ml 氯霉素及所选质粒筛选 抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。--
5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。--
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上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
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