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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
29
- 英文名:
GT115 感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ul*10
产品描述:
GT115 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)乙酸钠三水(分子生物学级)Sodium acetate, trihydrate质量规格:>99%,分子生物学级
人骨骼肌成肌细胞(HSkMM)(5×105) 小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Mouse脱叶灵,噻苯隆Thidiazuron质量规格:>98%,分子生物学级
中国仓鼠肺细胞;V79(AR)Iodine质量规格:>99.5%,AR
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙醇脱氢酶ADA, Alcohol dehydrogenase 质量规格:>300U/mg,BR
CL-0045C-33 A(人子细胞)5×106cells/瓶×2吐温80(化学)Tween-80质量规格:CP
Sf-21(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2草酸铜(>97%,Tech Grade)Copper(II) oxalate hydrate质量规格:>97%,工业级
Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml无水硫酸铜(>99%,BR)Copper(II) sulfate, anhydrous质量规格:>99%,BR
人脊髓星形胶质细胞cDNAHA-sp cDNA肌1;肌酐Creatinine质量规格:>99%,BR
SCGB1A1 Others Human 人 SCGB1A1 / Uteroglobin 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸性猩红7B(>70%,BS)Crocein scarlet 7B质量规格:>70%,BS
ACTE1 非洲爪蟾胚胎细胞酸性红44(BS)Crystal ponceau 6R质量规格:BS
乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Acetamide 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 犬白介素7受体(IL7R)免疫试剂盒 Dog ierleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit
茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8ELISAKit 96T/48T
癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) Bis(2-ethylhexyl) sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC) 犬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒 Dog Ierleukin-8,IL-8 ELISA Kit
1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 1,4-Butanediol 质量规格:standard for GC,≥99%(GC) 犬白细胞分化抗原6(CD6)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation6,CD6ELISAKit 96T/48T
1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) (±)-1,2,4-Butanetriol 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation8,CD8ELISAKit 96T/48T
癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC) 犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)免疫试剂盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl laurate 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 犬表达于SiSo细胞系的受体结合型抗原(EBAG9)免疫试剂盒 Dog Receptor-binding cancer aigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit
棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) Methyl palmitate 质量规格:Standard for GC,≥98.0%(GC) 犬表面活性蛋白D(SP-D)免疫试剂盒 Canine surfacta protein D,SP-D ELISA Kit
水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl salicylate 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Dog asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA kit
油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC)) Methyl oleate 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 犬成纤维细胞生长因子23(FGF23)免疫试剂盒 Canine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
GT115 感受态细胞100ul*10犬白介素6(IL-6)免疫试剂盒 Dog Ierleukin 6,IL-6 ELISA Kit 己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Adipic acid 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬白介素7受体(IL7R)免疫试剂盒 Dog ierleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit 乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Acetamide 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8 96T/48T 茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC)
犬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒 Dog Ierleukin-8,IL-8 ELISA Kit 癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) Bis(2-ethylhexyl) sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)
犬白细胞分化抗原6(CD6)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation6,CD6 96T/48T 1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 1,4-Butanediol 质量规格:standard for GC,≥99%(GC)
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation8,CD8 96T/48T 1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) (±)-1,2,4-Butanetriol 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)免疫试剂盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC)
犬表达于SiSo细胞系的受体结合型抗原(EBAG9)免疫试剂盒 Dog Receptor-binding cancer aigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit 甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl laurate 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬表面活性蛋白D(SP-D)免疫试剂盒 Canine surfacta protein D,SP-D ELISA Kit 棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) Methyl palmitate 质量规格:Standard for GC,≥98.0%(GC)
犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Dog asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA kit 水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl salicylate 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
GT115 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
| 产品名称 | 包装 | 分类 |
| GT115 感受态细胞100ul*10 | 100ul*10 | 克隆感受态细胞 |
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)乙酸钠三水(分子生物学级)Sodium acetate, trihydrate质量规格:>99%,分子生物学级
人骨骼肌成肌细胞(HSkMM)(5×105) 小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs) Mouse脱叶灵,噻苯隆Thidiazuron质量规格:>98%,分子生物学级
中国仓鼠肺细胞;V79(AR)Iodine质量规格:>99.5%,AR
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙醇脱氢酶ADA, Alcohol dehydrogenase 质量规格:>300U/mg,BR
CL-0045C-33 A(人子细胞)5×106cells/瓶×2吐温80(化学)Tween-80质量规格:CP
Sf-21(昆虫细胞) 5×106cells/瓶×2草酸铜(>97%,Tech Grade)Copper(II) oxalate hydrate质量规格:>97%,工业级
Gibco 12556-023 TM-C100 Supplem e,liquid 75ml无水硫酸铜(>99%,BR)Copper(II) sulfate, anhydrous质量规格:>99%,BR
人脊髓星形胶质细胞cDNAHA-sp cDNA肌1;肌酐Creatinine质量规格:>99%,BR
SCGB1A1 Others Human 人 SCGB1A1 / Uteroglobin 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸性猩红7B(>70%,BS)Crocein scarlet 7B质量规格:>70%,BS
ACTE1 非洲爪蟾胚胎细胞酸性红44(BS)Crystal ponceau 6R质量规格:BS
乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Acetamide 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 犬白介素7受体(IL7R)免疫试剂盒 Dog ierleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit
茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8ELISAKit 96T/48T
癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) Bis(2-ethylhexyl) sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC) 犬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒 Dog Ierleukin-8,IL-8 ELISA Kit
1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 1,4-Butanediol 质量规格:standard for GC,≥99%(GC) 犬白细胞分化抗原6(CD6)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation6,CD6ELISAKit 96T/48T
1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) (±)-1,2,4-Butanetriol 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation8,CD8ELISAKit 96T/48T
癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC) 犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)免疫试剂盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit
甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl laurate 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 犬表达于SiSo细胞系的受体结合型抗原(EBAG9)免疫试剂盒 Dog Receptor-binding cancer aigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit
棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) Methyl palmitate 质量规格:Standard for GC,≥98.0%(GC) 犬表面活性蛋白D(SP-D)免疫试剂盒 Canine surfacta protein D,SP-D ELISA Kit
水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl salicylate 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Dog asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA kit
油酸甲酯(Standard for GC,≥99%(GC)) Methyl oleate 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 犬成纤维细胞生长因子23(FGF23)免疫试剂盒 Canine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
GT115 感受态细胞100ul*10犬白介素6(IL-6)免疫试剂盒 Dog Ierleukin 6,IL-6 ELISA Kit 己二酸(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Adipic acid 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬白介素7受体(IL7R)免疫试剂盒 Dog ierleukin 7 receptor,IL7R ELISA kit 乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Acetamide 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA检测试剂盒CanineIerleukin-8,IL-8 96T/48T 茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC)
犬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫试剂盒 Dog Ierleukin-8,IL-8 ELISA Kit 癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) Bis(2-ethylhexyl) sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)
犬白细胞分化抗原6(CD6)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation6,CD6 96T/48T 1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 1,4-Butanediol 质量规格:standard for GC,≥99%(GC)
犬白细胞分化抗原8(CD8)ELISA检测试剂盒Canineclusterofdiffereiation8,CD8 96T/48T 1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) (±)-1,2,4-Butanetriol 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)免疫试剂盒 Canine Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 癸酸甲酯(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) Methyl decanoate 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC)
犬表达于SiSo细胞系的受体结合型抗原(EBAG9)免疫试剂盒 Dog Receptor-binding cancer aigen expressed on SiSo cells,EBAG9 ELISA kit 甲酯(Standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl laurate 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
犬表面活性蛋白D(SP-D)免疫试剂盒 Canine surfacta protein D,SP-D ELISA Kit 棕榈酸甲酯(Standard for GC,≥98.0%(GC)) Methyl palmitate 质量规格:Standard for GC,≥98.0%(GC)
犬不对称二甲基精氨酸(ADMA)免疫试剂盒 Dog asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA kit 水杨酸甲酯(standard for GC,≥99.5%(GC)) Methyl salicylate 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
GT115 感受态细胞100ul*10操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
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GT115 感受态细胞100ul*10
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