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SURE 感受态细胞100ul*50

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  • 博湖
  • BH-G2051
  • 进口、国产
  • 2025年07月13日
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    • 英文名

      SURE 感受态细胞

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海博湖

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100ul*50

    同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
    答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
    产品描述:
    产品名称 包装 分类
    SURE 感受态细胞100ul*50 100ul*50 克隆感受态细胞
    产品细节图片1
    产品细节图片2
    SURE 感受态细胞100ul*50注意事项:
    1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。 
    2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
    3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

    GP120 Others HIV 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp120 / SU 人细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)Methyl Stearate质量规格:>99.5%(GC),标准物质
    中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24亚麻酸甲酯(>98.0%(GC),标准物质)Methyl Linolenate质量规格:>98.0%(GC),标准物质
    EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚油酸甲酯(>99.0%(GC),标准物质)Methyl Linoleate质量规格:>99.0%(GC),标准物质
    颌下腺上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)1-十一1(>99.5%(GC),标准物质)1-Undecene质量规格:>99.5%(GC),标准物质
    P3HR1细胞,人EBV阳性B淋巴瘤细胞 大鼠胰腺癌细胞株,DSL-6A/C1细胞 人小脑星形胶质细胞cDNAHA-c cDNA1-十二1(>99.5%(GC),标准物质)1-Dodecene 质量规格:>99.5%(GC),标准物质
    QGY-7701(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸组氨瑞林 Histrelin Acetate质量规格:BR,>98%

    人结直肠腺癌细胞;COLO 205青霉素VPenicillin V potassium salt质量规格:1440~1680 U/mg,BR
    CD47 Others Human CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧肌苷2'-deoxyinosine质量规格:>98%,BR
    mEPC, 小鼠内皮祖细胞-骨髓盐酸尼非卡兰Nifekalant hydrochloride质量规格:>98%,BR
    3T3TK细胞,小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg盐酸尼非卡兰(标准品)Nifekalant hydrochloride质量规格:HPLC>99%,标准品
    硬脂酸胆酯(>98%,BR)  Cholesteryl stearate  质量规格:>98%,BR 活力和顶体形态双重荧光染色试剂盒20

    重胆碱(>98%,BR)  Choline bitartrate  质量规格:>98%,BR 活力-死亡细菌双重荧光检测试剂盒50
    铬粒(>99%BR)  Chromium granular  质量规格:>99%,BR 活力-死亡真菌/酵母细胞双重荧光检测试剂盒50
    铬粉(>99%BR)  Chromium powder  质量规格:>99%,BR 活力伊eosin-nigrosin)染色试剂盒50
    氯化铬六水(>98%,BR)  Chromium(III) chloride, hexahydrate  质量规格:>98%,BR 活力荧光染色试剂盒50
    硫酸钾铬十二水  Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate  质量规格:>98%,BR 活体内蛋白质交联免疫共沉淀检测试剂盒10
    硫酸铬(>98%,BR)  Chromium(III) sulfate, hydrate  质量规格:>98%,BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)总活性原位荧光染色检测试剂盒20
    酸性红B  Chromotrope FB  质量规格:>60%,BS 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性原位荧光染色检测试剂盒20
    直接黄12  Chrysophenine  质量规格:>70%,BS 活体细胞半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位荧光染色检测试剂盒20
    肉桂酰胺(>98%BR)  Cinnamamide  质量规格:>98%BR 活体细胞半胱氨酸蛋白酶12(CASPASE-12)活性原位荧光染色检测试剂盒20
    SURE 感受态细胞100ul*50活力和顶体反应三色(iplestaining)染色试剂盒50 乙酸胆酯(>96%,BR)  Cholesteryl acetate  质量规格:>96%,BR

    活力和顶体形态双重荧光染色试剂盒20 硬脂酸胆酯(>98%,BR)  Cholesteryl stearate  质量规格:>98%,BR
    活力-死亡细菌双重荧光检测试剂盒50 重胆碱(>98%,BR)  Choline bitartrate  质量规格:>98%,BR
    活力-死亡真菌/酵母细胞双重荧光检测试剂盒50 铬粒(>99%BR)  Chromium granular  质量规格:>99%,BR
    活力伊黑(eosin-nigrosin)染色试剂盒50 铬粉(>99%BR)  Chromium powder  质量规格:>99%,BR
    活力荧光染色试剂盒50 氯化铬六水(>98%,BR)  Chromium(III) chloride, hexahydrate  质量规格:>98%,BR
    活体内蛋白质交联免疫共沉淀检测试剂盒10 硫酸钾铬十二水  Chromium(III) potassium sulfate, dodecahydrate  质量规格:>98%,BR
    活体细胞半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)总活性原位荧光染色检测试剂盒20 硫酸铬(>98%,BR)  Chromium(III) sulfate, hydrate  质量规格:>98%,BR
    活体细胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性原位荧光染色检测试剂盒20 酸性红B  Chromotrope FB  质量规格:>60%,BS
    活体细胞半胱氨酸蛋白酶-10(CASPASE-10)活性原位荧光染色检测试剂盒20 直接黄12  Chrysophenine  质量规格:>70%,BS
    SURE 感受态细胞100ul*50操作方法:
    1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
    2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
    3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
    4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
    5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。
    感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
    答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

     

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