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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Stbl3 电击感受态细胞
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
50ul*5
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:Stbl3 电击感受态细胞50ul*5
规格:50ul*5
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5操作说明:
1. 0.1
cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞)5×106cells/瓶×2铕标准溶液(1000μg/ml) Europium standard质量规格:1000μg/ml
BI U-87细胞,膀胱癌细胞 总T淋巴细胞,OKT3细胞 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1氟离子(F-)标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Fluoride standard质量规格:500mg/L,溶剂:水
BRL(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2氟离子(F-)标准溶液(1000mg/L,基体:水) Fluoride standard质量规格:1000mg/L,基体:水
CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 金标准溶液(1000μg/ml)Gold standard质量规格:1000μg/ml
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1锗标准溶液(1000μg/ml)Germanium standard质量规格:1000μg/ml
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞大麦芽碱(标准品)Hordenine质量规格:HPLC≥95%,标准品
RN-s, 大鼠纹状体神经元 [X464-20C]细胞 Vero(非洲绿猴肾细胞)丹参素(标准品)Danshensu质量规格:HPLC≥98%,标准品
人十二脂肠腺癌;HuTu-80丹参素Danshensu质量规格:HPLC>95%,丹参提取
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) 丹参素钠(标准品)Sodium Danshensu质量规格:HPLC≥98%,标准品
人结直肠腺癌细胞;LoVo丹参酮I(标准品)Tanshinone I质量规格:HPLC≥98%,标准品
油酸乙酯(>95.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>95.0%(GC) 英文名称HumanCD14ELISAKit人CD14规格:96T/48T
癸二酸二丁酯(>98.0%(GC)) Dibutyl Sebacate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD163ELISAKit人CD163规格:96T/48T
癸二酸二甲酯(>97.0%(GC)) Dimethyl Sebacate 质量规格:>97.0%(GC) 英文名称HumanCD23ELISAKit人CD23规格:96T/48T
癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC)) Di-n-octyl Sebacate 质量规格:>95.0%(GC) 英文名称HumanCD26ELISAKit人CD26规格:96T/48T
三乙二醇二甲基醚(添加稳定剂BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD30ELISAKit人CD30规格:96T/48T
二乙二醇二丁基醚(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Dibutyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD40LELISAKit人CD40L规格:96T/48T
二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCeruloplasmin(CP)ELISAKit人铜蓝蛋白(CP)规格:96T/48T
三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCICPELISAKit人I型腺原蛋白C末端前肽(CICP)规格:96T/48T
O-乙酰基蓖麻酸甲酯(>80.0%(GC)) Methyl O-Acetylricinoleate 质量规格:>80.0%(GC) 英文名称HumanCiliaryNeuroophicFactorELISAkit人睫状神经营养因子(CF)规格:96T/48T
柠檬酸三乙酯(>99.0%(GC)) Triethyl Citrate 质量规格:>99.0%(GC) 英文名称HumanCINC-1ELISAKit人CINC-1规格:96T/48T
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5英文名称HumanCCL2人CCL2规格:96T/48T 壬二酸二甲酯(>98.0%(GC)) Dimethyl Azelate 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCCL3人CCL3规格:96T/48T 己二酸双(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) Bis(2-butoxyethyl) Adipate 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称HumanCCL7人CCL7规格:96T/48T 油酸乙酯(>70.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>70.0%(GC)
英文名称HumanCD14人CD14规格:96T/48T 油酸乙酯(>95.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称HumanCD163人CD163规格:96T/48T 癸二酸二丁酯(>98.0%(GC)) Dibutyl Sebacate 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCD23人CD23规格:96T/48T 癸二酸二甲酯(>97.0%(GC)) Dimethyl Sebacate 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称HumanCD26人CD26规格:96T/48T 癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC)) Di-n-octyl Sebacate 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称HumanCD30人CD30规格:96T/48T 三乙二醇二甲基醚(添加稳定剂BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCD40L人CD40L规格:96T/48T 二乙二醇二丁基醚(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Dibutyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCeruloplasmin(CP)人铜蓝蛋白(CP)规格:96T/48T 二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC)
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:Stbl3 电击感受态细胞50ul*5
规格:50ul*5
分类:克隆感受态细胞
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5操作说明:
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19; --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--。
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃,225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
CL-0037BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞)5×106cells/瓶×2铕标准溶液(1000μg/ml) Europium standard质量规格:1000μg/ml
BI U-87细胞,膀胱癌细胞 总T淋巴细胞,OKT3细胞 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1氟离子(F-)标准溶液(500mg/L,溶剂:水) Fluoride standard质量规格:500mg/L,溶剂:水
BRL(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2氟离子(F-)标准溶液(1000mg/L,基体:水) Fluoride standard质量规格:1000mg/L,基体:水
CPA2 Others Human 人 CPA2 / Carboxypeptidase-A2 人细胞裂解液 (阳性对照) 金标准溶液(1000μg/ml)Gold standard质量规格:1000μg/ml
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1锗标准溶液(1000μg/ml)Germanium standard质量规格:1000μg/ml
HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞大麦芽碱(标准品)Hordenine质量规格:HPLC≥95%,标准品
RN-s, 大鼠纹状体神经元 [X464-20C]细胞 Vero(非洲绿猴肾细胞)丹参素(标准品)Danshensu质量规格:HPLC≥98%,标准品
人十二脂肠腺癌;HuTu-80丹参素Danshensu质量规格:HPLC>95%,丹参提取
CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) 丹参素钠(标准品)Sodium Danshensu质量规格:HPLC≥98%,标准品
人结直肠腺癌细胞;LoVo丹参酮I(标准品)Tanshinone I质量规格:HPLC≥98%,标准品
油酸乙酯(>95.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>95.0%(GC) 英文名称HumanCD14ELISAKit人CD14规格:96T/48T
癸二酸二丁酯(>98.0%(GC)) Dibutyl Sebacate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD163ELISAKit人CD163规格:96T/48T
癸二酸二甲酯(>97.0%(GC)) Dimethyl Sebacate 质量规格:>97.0%(GC) 英文名称HumanCD23ELISAKit人CD23规格:96T/48T
癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC)) Di-n-octyl Sebacate 质量规格:>95.0%(GC) 英文名称HumanCD26ELISAKit人CD26规格:96T/48T
三乙二醇二甲基醚(添加稳定剂BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD30ELISAKit人CD30规格:96T/48T
二乙二醇二丁基醚(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Dibutyl Ether 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCD40LELISAKit人CD40L规格:96T/48T
二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCeruloplasmin(CP)ELISAKit人铜蓝蛋白(CP)规格:96T/48T
三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称HumanCICPELISAKit人I型腺原蛋白C末端前肽(CICP)规格:96T/48T
O-乙酰基蓖麻酸甲酯(>80.0%(GC)) Methyl O-Acetylricinoleate 质量规格:>80.0%(GC) 英文名称HumanCiliaryNeuroophicFactorELISAkit人睫状神经营养因子(CF)规格:96T/48T
柠檬酸三乙酯(>99.0%(GC)) Triethyl Citrate 质量规格:>99.0%(GC) 英文名称HumanCINC-1ELISAKit人CINC-1规格:96T/48T
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5英文名称HumanCCL2人CCL2规格:96T/48T 壬二酸二甲酯(>98.0%(GC)) Dimethyl Azelate 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCCL3人CCL3规格:96T/48T 己二酸双(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) Bis(2-butoxyethyl) Adipate 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称HumanCCL7人CCL7规格:96T/48T 油酸乙酯(>70.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>70.0%(GC)
英文名称HumanCD14人CD14规格:96T/48T 油酸乙酯(>95.0%(GC)) Ethyl Oleate 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称HumanCD163人CD163规格:96T/48T 癸二酸二丁酯(>98.0%(GC)) Dibutyl Sebacate 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCD23人CD23规格:96T/48T 癸二酸二甲酯(>97.0%(GC)) Dimethyl Sebacate 质量规格:>97.0%(GC)
英文名称HumanCD26人CD26规格:96T/48T 癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC)) Di-n-octyl Sebacate 质量规格:>95.0%(GC)
英文名称HumanCD30人CD30规格:96T/48T 三乙二醇二甲基醚(添加稳定剂BHT)(>98.0%(GC)) Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT) 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCD40L人CD40L规格:96T/48T 二乙二醇二丁基醚(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Dibutyl Ether 质量规格:>98.0%(GC)
英文名称HumanCeruloplasmin(CP)人铜蓝蛋白(CP)规格:96T/48T 二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC)) Diethylene Glycol Diacetate 质量规格:>98.0%(GC)
Stbl3 电击感受态细胞50ul*5培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
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