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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
GV3101（pSoup） 感受态细胞
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海博湖
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100ul*50
规格：100ul*50
分类：根癌农杆菌感受态细胞
保存条件（保质期）： -80℃（6个月）
GV3101（pSoup） 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
GV3101（pSoup） 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm) 避免用
力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
GV3101（pSoup） 感受态细胞100ul*50操作说明：
待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19； --
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA 浓度 不超过 100ng/μl，体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 用 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖--。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推 荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后，转移到 50ml 离心管（BD Falcon50ml 锥形离心管等），向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml。 37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大，若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。
原代骨骼肌细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml盐酸镧六水(>99%,BR)Lanthanum (III) chloride, hexahydrate质量规格：>99%,BR
ROBO4 Others Human 人 ROBO4 人细胞裂解液 (阳性对照) 三氧化钼(>98%,BR)Molybdic oxide质量规格：>98%,BR
MDCK 狗肾细胞木瓜蛋白酶悬浮液Papain 2x crystallized from papaya Latex质量规格：比活度：>20 U/mg，BC
散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ21苯磺酸钠(>98%，BR)Sodium benzenesulfonate质量规格：>98%，BR
U-2 OS, 人骨肉瘤细胞过氧化物歧化酶(SOD)Superoxide dismutase from Bovine Erythrocytes(SOD)质量规格：比活度：>5000 U/mg,BC
人肺细胞;HLF-a2-苄基咪唑啉2-Benzylimidazoline质量规格：美国进口
GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 氨基比林Amidopyrine/aminopyrine质量规格：>98%,AR
恒河猴肾细胞;MMK3血管紧张素IIAngiotensin II质量规格：>98.0%,BR
Ls-174-T细胞，人结肠癌细胞 人色素瘤细胞,SK23细胞 人细胞;Hela维生素 D3 ((胆骨化醇)Vitamin D3质量规格：>98.0%(HPLC)4000万IU/g
HCCC-9810(人肝内胆管癌细胞) 5×106cells/瓶×2帕唑帕尼盐酸盐Pazopanib HCl质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
化新斯的明(标准品) Neostigmine bromide 质量规格：>98%,标准品 小鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒 ，英文名： C4 ELISA Kit
木兰脂素 Magnolin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒 ，英文名： C4a ELISA Kit
消旋山莨菪碱 Racanisodamine 质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠补体成分4b(C4b)ELISA试剂盒 ，英文名： C4b ELISA Kit
磺胺间二甲氧嘧啶钠 Sulfadimethoxine sodium salt 质量规格：>98% 小鼠补体成分5(C5)ELISA试剂盒 ，英文名： C5 ELISA Kit
磺胺间二甲氧嘧啶钠(标准品) Sulfadimethoxine sodium salt 质量规格：>98%,标准品 小鼠补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒 ，英文名： C5a ELISA Kit
毛地黄毒苷配基 Digitoxigenin 质量规格：>97.0%(LC),原装进口 小鼠补体成分5a受体1(C5aR1)ELISA试剂盒 ，英文名： C5aR1 ELISA Kit
柯诺辛碱 Corynoxine 质量规格：HPLC≥95%，标准品 小鼠补体蛋白3(C3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
乌拉地尔(标准品) Urapidil 质量规格：HPLC>98%,标准品 小鼠补体蛋白3(C3)ELISA检测试剂盒MouseCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T
夫西地酸钠 Fusidate Sodium 质量规格：>97%,BR 小鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒 ，英文名： C3 ELISA Kit
夫西地酸钠(标准品) Fusidate Sodium 质量规格：HPLC≥98%,标准品 小鼠补体蛋白4(C4)ELISA检测试剂盒MouseCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T
GV3101（pSoup） 感受态细胞100ul*50小鼠补体3a(C3a)ELISA试剂盒 ，英文名： C3a ELISA Kit L-生物喋呤 L-Biopterin 质量规格：>98%,BR
小鼠补体C4(C4)ELISA试剂盒 ，英文名： C4 ELISA Kit 渥曼青霉素 Wortmannin 质量规格：>98%,美国进口,PI3K/AKT通路的抑制剂
小鼠补体成分3(C3)ELISA试剂盒 ，英文名： C3 ELISA Kit 化新斯的明 Neostigmine bromide 质量规格：>98%
小鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒 ，英文名： C4 ELISA Kit 化新斯的明(标准品) Neostigmine bromide 质量规格：>98%,标准品
小鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒 ，英文名： C4a ELISA Kit 木兰脂素 Magnolin 质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠补体成分4b(C4b)ELISA试剂盒 ，英文名： C4b ELISA Kit 消旋山莨菪碱 Racanisodamine 质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠补体成分5(C5)ELISA试剂盒 ，英文名： C5 ELISA Kit 磺胺间二甲氧嘧啶钠 Sulfadimethoxine sodium salt 质量规格：>98%
小鼠补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒 ，英文名： C5a ELISA Kit 磺胺间二甲氧嘧啶钠(标准品) Sulfadimethoxine sodium salt 质量规格：>98%,标准品
小鼠补体成分5a受体1(C5aR1)ELISA试剂盒 ，英文名： C5aR1 ELISA Kit 毛地黄毒苷配基 Digitoxigenin 质量规格：>97.0%(LC),原装进口
小鼠补体蛋白3(C3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 柯诺辛碱 Corynoxine 质量规格：HPLC≥95%，标准品
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文献和实验Agrobacterium growth and transformation (农杆菌培养及转化)
otherwise. With the pGreen system, co-transform with pSoup, and select on kanamycin. Strain Chromosomal selection Ti-plasmid Selection LBA4404 Rifampicin pAL4404 Streptomycin GV3101 Rifampicin pMP90 Gentamicin Generally rifampicin and kanamycin can be used
Agrobacterium growth and transformation
system, co-transform with pSoup, and select on kanamycin. Strain Chromosomal selection Ti-plasmid Selection LBA4404 Rifampicin pAL4404 Streptomycin GV3101 Rifampicin pMP90 Gentamicin Generally rifampicin and kanamycin can be used at 50ug/mL
Agrobacterium growth and transformation
Growth and storage of Agrobacterium tumefaciensStrain GV3101: resistant to gentamycin and rifampicin so add 25-50 ug/ml Gentamycin, 10 ug/ ml rifampicin on plates or in liquid media for selection. GV3101 is sensitive to kanamycin (or chloramphenicol
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
