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- H120
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- 2025年07月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详询
- 细胞类型：
详询
- 供应商：
蒂科生物
- 库存：
5000
- 英文名：
KB
- 生长状态：
良好
- 运输方式：
干冰
- 器官来源：
人
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 细胞形态：
上皮样
- 免疫类型：
详询
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
详询
- 组织来源：
人
- 规格：
T25
细胞系使用说明书
| 细胞名称 |
KB 人口腔表皮样癌细胞 |
| 货号 |
H120 |
| 种属 |
人 |
| 细胞来源 |
ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
| 生长特性 |
贴壁 上皮细胞样 |
| 培养条件 |
培养基：DMEM +10%FBS （推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-50） 温度：37℃ 气相：95%空气,5% CO2 |
| 传代 |
1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液； 2.待细胞长至80-90%时，需要对其进行传代，推荐传代比例为1:3至1:5 ； 3传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDA消化液置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心5min，弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。 |
| 保存 |
冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO (备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。) 保存条件：液氮存储 |
| 供应限制 |
仅供研究之用 |
| 常见问题及解决方案 |
1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。 2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基 3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。 |
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文献和实验owen79 各位大侠好，小弟愚问一下，我想测定NF-KB活化后细胞核内的量，这需要提取核蛋白，但是蛋白量太少，提取出来能否测出NF-KB啊！thank you ! ronaldo_zj 1. 通过提取细胞核、细胞浆内的蛋白来行western blot检测NF-kappa B 的表达情况是可以的，因为很多时候是通过NF-kappa B转位来实现活化的，所以提取的时候我不知道楼主是自己配制试剂提取还是用试剂盒提取的，我建议
pmlt 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半定量检测可以么？ 细胞因子 可以，做完WB后用Image软件经行成像分析，可以半定量检测。园子里有很多这方面的帖子，你可以看看。 doctormy pmlt wrote: 我想做nf-kb的激活，请问如果我只用western 做Ikba和p-Ikba的半
superskyfly 我自己都觉得我自己很牛，千百人都做出来的试验，我就是做不出来。质粒用的是Promega p4.32-NF-kB-Luc, 转染用的是Invitrogen的Lipofactamin, 激活用的是Sigma生产的PMA和PHA-P,Assay用的是Promega dual,结果加了PMA和PHA的和不加的读数几乎没有区别。加了compound的和不加的也没有区别。 用过PC3, Jurkat, A549，HCT116都是一样。
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