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- 2026年02月10日
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rAAV-EF1α-DIO-hM4D(Gi)-mCherry-WPREs
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BrainVTA
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详见说明
EF1α：elongation factor 1-alpha，人类靶向延长因子，广谱性强启动子。
DIO：Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达，在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。
mCherry：红色荧光蛋白，激发波长587nm，发射波长610nm。
hM4D(Gi)：hM4D(Gi)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M4 上改造的仅对CNO（clozapine-N-oxide）有反应的人工受体（designer receptors exclusivelyactivated by designer drugs，DREADD），不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里，CNO 结合hM4D 后，激活Gi 蛋白偶联的内向钾离子通道GIRK，使得细胞膜超极化，抑制神经元细胞动作电位发放。在不表达GIRK 或是Gi 的细胞中,hM4D 的功能会有所不同。
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文献和实验100ul 苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）抽提，并沉淀出cDNA双链，溶解于50ul双蒸水中。三、cDNA质量检测根据一个油菜线粒体基因Ccl1（GI：1694628）的cDNA序列设计特异性引物（CF：5′-TGA CAC GAG ATG ATA AAG A-3′ CR：5′-CGT AAC AAT AGA GCA GGA TAG-3′），目标片段大小为427bp。以反转录所得cDNA为模板，若PCR扩增能得到目标片段，说明线粒体mRNA已经成功反转录。四、Rsa I酶切双链cDNA
xiaoleishi 我现在做的是小胶质细胞，要做akt信号通路，但现在查到akt抑制剂有很多种，应该怎样选择？谢谢。 pennhmp116 一般来说某个靶点抑制剂的研究也是不断进展的，随着化工技术和计算机模拟分析模拟技术进步，许多靶点上新的抑制剂都比早期的更为有效、更加具有特异性，水溶解性更好、性质更稳定等优点。除了靶点的活性外，其毒性也是决定它是否现在应用于动物体内实验，将来应用于临床成功与否的关键。如NF-kB抑制
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异生调节网络中起着关键作用，并可能成为 T2D 的潜在治疗靶点。图片来源： Cell Metabolism 研究内容 1. Kinome（人激酶组）筛选锁定 NLK 是 HGP 关键抑制因子 候选激酶亚群中 NLK 对 Pck1 和 G6pc（糖异生关键酶）启动子活性均表现出明显的抑制作用。在小鼠原代肝细胞中，过表达 NLK 可以显著抑制 Pck1 和 G6pc 基因的 mRNA 和蛋白水平，而过表达 NLK 功能突变体（K167M）则未能发挥抑制功能。实验结果表明，NLK 通过激酶活性抑制肝糖
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