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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
rAAV-CAG-DIO-eNpHR3.0-mCherry
- 供应商:
BrainVTA
- 保存条件:
详见说明
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
CAG:是人工构建的组合型强启动子,由巨细胞病毒(the cytomegalovirus,CMV)早期增强子(early enhancer element)和鸡β-肌动蛋白( chickenbeta-actin )启动子和兔的beta-globin剪接受体组成。用于驱动基因在哺乳动物中的高水平表达。
DIO:Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达,在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。
NpHR:光驱动的氯离子泵,属于Halorhodopsin。常见的版本为NpHR3.0,其在NpHR 的基础上添加了内质网顺向运输信号和高尔基体向细胞膜转运信号,改善了其在细胞膜上的表达状况,是最常用的光抑制工具。NpHR 通常用570nm左右的黄光驱动,可以和hChR2(H134R)同时使用。
mCherry:红色荧光蛋白,激发波长587nm,发射波长610nm。
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文献和实验Sun’s lab. Science 2017[1]注射部位:小鼠脊髓载体:AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R)-mCherry& AAV-hSyn-eNpHR3.0-EYFP血清型:rAAV2/9病毒滴度:5.1× 1012 VG/mL&1.7× 1013 VG/mL注射体积:400-600nl Zhong Chen’s lab. Nat Commun, 2020[2]注射部位:PV-Cre小鼠的SNr区载体:PV-Cre: AAV-EF1a-DIO-ChR2(H134R
化学遗传学技术(或称药理遗传学技术)是近年来与光遗传学一起出现的重要新技术。该技术通过对一些生物大分子实行改造,使其能和先前无法识别的小分子进行相互作用,从而达到可控、可逆(可以随时加入或除去化合物,从而启动或中断特定的反应)控制生物大分子的活性,该技术已经在信号转导、药物开发、功能基因组学等方面的研究中得到了广泛的应用。他们被广泛用于以细胞特异性、无创地增强或抑制神经元的活动。虽然DREADD缺乏像光遗传学那样精准的时间控制能力,但是由于在进行疾病治疗时,最有可能需要的是长期神经元环路调节
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