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- 2026年01月05日
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rAAV-EF1α-DIO-hM3D(Gq)-EYFP
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BrainVTA
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详见说明
EF1α：elongation factor 1-alpha，人类靶向延长因子，广谱性强启动子。
DIO：Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达，在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。
hM3D(Gq)：hM3D(Gq)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M3 上改造的仅对CNO（clozapine-N-oxide）有反应的人工受体（designer receptors exclusivelyactivated by designer drugs，DREADD），不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里，CNO 结合hM3D 后，激活Gq 蛋白偶联的磷酸酶PLCβ，引起PIP2被降解，从而使得被PIP2 关闭的KCNQ 外向钾离子通道被打开，以至于细胞膜去极化，形成动作电位，即激活神经元。在KCNQ 或是Gq 不表达的神经元里，hM3D 的功能可能会有所不同。
EYFP：黄色荧光蛋白，激发波长513nm，发射波长527nm。
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文献和实验DREADDs技术。 图1.化学遗传学技术1. DREADDs技术DREADDs技术是由Bryan L. Roth等人发明的，他们改变了G蛋白偶联受体—乙酰胆碱受体的结构，改变后其只能被特定的化合物Clozapine-N-oxide（CNO）激活或者抑制。此类改变的受体会选择性地作用于不同的GPCR级联反应，包括Gq、Gi、Gs、Golf和β-arrestin，其中应用最广泛的是Gq-DREADD和Gi-DREADD。通过将上述受体在细胞内表达，在CNO的作用下，其产生的结果各不相同。 图2 常用的几种
操控工具。如基因编码的钙指示剂 (GECIs: GCaMP, jRGECO1)，基因编码的电压指示器 (Voltron, GEVIs: SomArchon)，神经递质探针 (如 DA/Ach/NE/ iGABASnFR) 和光遗传 / 化学遗传元件 (如 ChR2, eNpHR, hM3Dq, hM4Di) 很容易被包装并通过 AAVs 传递。rAAV 是表达小基因序列的理想载体，借助其，我们可以对细胞内的基因进行操作，包括基因功能获取（Gain of function）和基因功能缺失（Loss
Cell：免疫记忆真的是一种「记忆」，可被大脑唤醒！激活特定神经，就可触发免疫反应
activated by designer drugs，由设计药物专门激活的设计受体）——Gq，它能够被 CNO（氯氮平-N-氧化物）激活，这样就能够在炎症消退后通过 CNO 处理重新激活这些神经元。 作者发现，在 DSS 诱导的肠炎消退后，再次激活 InsCtx 神经元会导致小鼠肠壁肌肉层浸润大量的白细胞；流式检测发现，用 CNO 激活 Gq 后，小鼠肠道 IEL（上皮内淋巴细胞）和 LP（固有层淋巴细胞）显著增加，并且分泌促炎性细胞因子 IL-6 的白细胞也明显增加。这些数据说明，激活 InsCtx
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