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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pCMV-3Tag-7-DTWD1
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pCMV-3Tag-7-DTWD1 Plasmid
Catalog No. PVTB00441-2a
Vector Backbone pCMV-3Tag-7
Backbone manufacturer Stratagene
Vector type Mammalian Expression
Backbone size w/o insert 5.3kb
Cloning site 5 BamH I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Xho I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain DH5alpha
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Hygromycin
Background Mammalian Expression vector of Homo sapiens DTW domain containing 1 with N terminal 3xMyc tag
Gene Information
Alternative Gene Name MDS009
Insert Gene name DTWD1
Insert size 915bp
Accessions NM_020234.5
Tag 3*Myc(N-term)
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 56986
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文献和实验liuruya 问别人要了个带GFP-tag(GFP-N2载体)的质粒,目的基因1.4kb,分子量约52kD,转染293T细胞能见荧光,WB杂不出来,设置了阴性和阳性对照证实不是WB的技术问题。后来又换了个flag-tag,仍然杂不出来WB。仔细检查过序列,不存在移码的问题,非常费解。有同学分析是空间位阻问题,不知换个tag是不是能解决这个问题。有同学遇到过这种问题么,或者帮忙分析一下可能的原因。谢谢!!! zhuqueleee
pCF-T M13F M13R pCI T7(17Base) 此载体无反向引物 pCI-neo T7(17Base) T3 pCMS-EGFP T7 T3 pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7 pCMV5 pCMV5F pCMV5R pCMV5-Flag pCMV5F pCMV5R pCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-R pCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13R pCMV-Tag(KAN+) T3 T7 pCR2.1-TOPO
质粒转染细胞的效率受到多种因素的影响,如细胞的类型,细胞的状态,转染时细胞的密度,转染的方式(电转或化转),DNA 的质量、转染试剂的选择等。从质粒角度来看,超螺旋比例高,且内毒素残留低的质粒会更有利于提高细胞转染的效率。 pCMVβ DNA 用不同试剂盒提取,转染 Huh-7 细胞,转染效率对比 5. 质粒酶切有问题,切不开或者酶切有杂带 酶切切不开可能跟酶本身状态、酶切缓冲液、酶切温度以及质粒本身都有关系。从酶切条件考虑,在确保酶活性的前提下,选择合适的酶切缓冲液、温度
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