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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
458
- 英文名:
HotStart UltraTaq DNA Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
250U
特别提示:包括热启动UltraTaq DNA聚合酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:热启动UltraTaq DNA聚合酶
英文名称:HotStart UltraTaq DNA Polymerase
产品货号:JN0026
产品规格:250U
本制品是UltraTaq经化学修饰处理后的制品。经处理后的Taq 酶在加热至高温前,其聚合酶活性被抑制,从而抑制低温条件下由 引物的非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。Hot Start UltraTaq DNA聚合酶在PCR反应最初的DNA变性时间延长到10分钟即可 恢复活性。本制品适用于高特异性PCR反应、Mutiplex PCR、高GC含 量(>60%),有二级结构等有较强背景的基因组扩增和大规模基因组 扩增检测。与普通的热启动Taq酶相比,本品具有延伸时间更短,产量更高,保真性比普通Taq提高了一倍。
产品组成:
| 组份 | JN0026-250U |
| HotStart UltraTaq 聚合酶(5U/μl) | 50μl |
| dNTP混合液(各10mM) | 200μl |
| 10×HotStart UltraTaq Buffer with Mg2+ | 2ml |
产品特点:
1、简便:与目前最有效的热启动酶条件一致,无需改变实验条件。
2、快速:扩增速度为普通Taq的4倍,72℃时10-15s可延伸1kb以 上。
3、高效:有效减少了杂带及拖带产生,从而实现高特异性的PCR。
4、高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
产品用途:
1、高特异性PCR反应;
2、复杂模板扩增;
3、Multiplex PCR;
4、基因组扩增检测;
5、荧光定量PCR。
应用实例:
图例一)使用 HotStart UltraTaq DNA 聚合酶进行的荧光定量PCR。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单 一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残 留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
常用反应体系(50μl)
| 10× HotStart UltraTaq Buffer | 5μl |
| 上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1μg(基因组) | |
| HotStart UltraTaq | 0.25μl(1.25U) |
| ddH2O | 至50μl |
| Mg2+终浓度为2mM | |
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Polymerase Chain Reaction--热启动PCR
This procedure is a "hot start" PCR cycle for use with large primers. PCR mass-produces DNA contained in the source plasmid between the two primer-binding sequences, eventually producing linear DNA starting with Primer 1, continuing
增加PCR特异性:引物设计、退火温度、递减PCR、引物浓度纯度和稳定性、热启动
1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点: ① 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长,保证序列独特性,并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错误配对
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