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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-20℃
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500U
特别提示:包括β葡糖基转移酶(T4噬菌体)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:β葡糖基转移酶(T4噬菌体)
产品货号:JN0074
产品规格:500U
本品能特异性地将尿嘧啶二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)的葡萄糖单元转移至双链DNA的5-羟甲基胞嘧啶残基上,形成β-葡糖基-5-羟甲基胞嘧啶。T4噬菌体beta葡萄糖转移酶通过克隆了T4噬菌体bgt基因的重组大肠杆菌获得。
本品对5-hmC残基的定向修饰来区分5-mC和5-hmC。这种酶可以将所有5-hmC糖基化,产生5-ghmC。这个反应是序 列无关的,因此所有5-hmC都将糖基化,而C或5-mC则不受影响。
产品用途:
1、糖基化DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
2、免疫检测DNA中5-羟甲基胞嘧啶。
3、通过与[3H]或[14C]-UDP-葡萄糖一起孵育将[3H]或[14C]-葡萄糖掺入到含有5-羟甲基胞嘧啶的DNA受体中,对5-羟甲基胞嘧啶残基标记。
4、通过核酸内切酶保护分析检测DNA中的5-羟甲基胞嘧啶。
基因组DNA中5-羟甲基胞嘧啶分析:
方案一
第1步:糖基化
基因组DNA用T4-BGT处理,让所有5-hmC糖基化,产生5-ghmC。这个反应是序列无关的,因此所有5-hmC都 将糖基化,未修饰或5-mC DNA则不受影响。
第2步:限制性内切酶消化
MspI和HpaII识别相同的序列(CCGG),但是对不同的甲基化状态敏感。HpaII只切割完全未修饰的位 点,胞嘧啶上的任何修饰(5-mC、5-hmC或5-ghmC)都阻碍切割。MspI则识别并切割5-mC和5-hmC,5-ghmC除外。
第3步:PCR分析
用引物扩增实验的靶DNA和对照的靶DNA。如果CpG位点含有5-羟甲基胞嘧啶,那么糖基化和消化之后检测 到条带,但是未糖基化的对照反应中没有。如果使用实时定量PCR,那么就可以估计这个位点大概有多少 羟甲基胞嘧啶。
方案二
TAB-Seq*
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:1 单位指能够保护 0.5 μg T4 bgt-DNA 免受 MfeI 限制性内切酶切割所需要的酶量。
10×反应缓冲液:50 mM Potassium Acetate,20 mM Tris- acetate,10 mM Magnesium Acetate,1 mM DTT, pH 7.9 at 25℃
贮存缓冲液:20 mM KPO4,200 mM NaCl,0.25 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol,pH 7.0 at 25℃
热失活:65℃,20分钟。
我公司销售的β葡糖基转移酶(T4噬菌体)报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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其包含超过 8 万个基因,并将单个基因与燕麦的农艺和营养特性联系起来,证明燕麦含有更高比例的 β-葡聚糖,可降低血液中的胆固醇水平! 图 2:来源 Nature 3. Science:夜晚尽快睡觉有助于摆脱抑郁心情 生活压力大且节奏快,现代人晚上常失眠至天明。 2022 年 5 月 13 日,瑞士伯尔尼大学 Antoine Adamantidis 教授团队在 Science 杂志发表研究论文 Paradoxical somatodendritic decoupling supports
;2 )用RNase H1酶将RNA:DNA杂交分子中的RNA 切割成小片断,以这些小片断为引物,用DNA多聚酶合成第二链cDNA,并用DNA连接酶连接各小片断DNA;3) 用3′端DNA末端转移酶在第一链cDNA 3′末端接上一个人工合成的寡聚核苷酸片断,再用另一个与其互补的人工合成引物与其互补引导DNA 多聚酶1 合成第二链cDNA;4) 在克隆载体上接有oligo(dT)63 .cDNA与载体的连接以及重组λ噬菌体的包装和铺板第二链cDNA合成后,必须在DNA两端加上带合适酶切位点的接头以供克隆、建库时连接
。 2.噬菌体DNA聚合酶 这里以T4DNA聚合酶为例。它也具有5’→3聚合酶活性,但它的外切酶活性比大肠杆菌的要高200倍。因此,它也可用来补齐单链末端或标记同位素。 (二)RNA聚合酶 RNA聚合酶(RNa polymerase)的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链,另有一个促进新RNA分子合成的σ因子,因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶(holoenzyme),除去了σ因子的酶称为核心酶。噬菌体
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