高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒北京现货

特别提示：包括高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒
英文名称：96wells DNA Product Purification and Recovery Kit
产品货号：WH0157
产品规格：4×96孔|24×96孔板

本试剂盒通过96孔吸附板特异性地结合酶切、PCR、测序等反应溶液中的DNA片段，可除去蛋白质、有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。纯化的DNA可适用于限制性酶切、测序、文库筛选，连接和转化等分子生物学实验。

产品特点：
·回收100bp-10kb DNA片段，回收率可达80%以上。
·每孔最多可吸附的DNA量为5μg。
·纯度高：可直接用于下游实验。

提取流程：


提取实例：

使用本试剂盒纯化900bp，3500bp，4500bp片段。50μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm电泳20min，1、2、3为本试剂盒纯化，4是使用某进口品牌试剂盒纯化。
 

组分	4板	24板
平衡液BL	240ml	3×500ml
结合液PB	240ml	3×500ml
漂洗液PW	3×50ml	2×500ml
洗脱缓冲液TB	60ml	240ml
半裙边96孔吸附板CB2	4板	24板
96孔深孔板	8板	48板
250ml试剂瓶	-	1个
封口膜	4张	24张

储存条件：室温（15-25℃)干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1．本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有DNA片段（可去除30 bp以下的小片段），如需选择性回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择胶回收试剂盒。
2．回收得率与DNA初始量及洗脱体积有关。DNA初始量越低，洗脱体积越少，回收得率越低。洗脱体积最好不要少于每孔60μl。
3．每次使用前取50ml漂洗液PW并加入200 ml无水乙醇摇匀后使用。
4．使用前请先检查平衡液BL是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。实验前使用平衡液处理吸附柱，可以最大限度激活硅基质膜，提高得率。
5．实验前使用平衡液BL处理吸附板，可以最大限度激活硅基质膜，提高得率。
6．用平衡液BL处理过的板子最好当天使用，放置时间过长会影响效果。

操作步骤：（离心法)
1．板平衡步骤：将96孔吸附板CB2叠放在96孔深孔板上，每孔中加入500 μl的平衡液BL，3,600rpm（～2,130×g)离心3 min，弃废液，将吸附板重新放回深孔板上。（请使用当天处理过的吸附板）
2．估计PCR反应液或酶切反应液的体积，向其中加入3倍体积的结合液PB。
  举例：如PCR反应体系为100 μl （不包括石蜡油体积)，则加入300 μl结合液PB。如果混合液体积超过PCR管的体积，可将PCR反应液或者酶切反应液转移到96孔深孔板中，与结合液PB进行混合再进行下游实验。
3．充分混匀后转移所有上述混合液到第一步平衡过的96孔吸附板CB2中。室温放置2 min，3,600rpm（～2,130×g)离心5 min，弃废液，将吸附板重新放回同一深孔板中。
  注意：单孔吸附柱容量为700 μl，若样品体积大于700 μl可分批加入离心。
4．向96孔吸附板CB2每孔中加入700 μl漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，3,600rpm（～2,130×g)离心3 min，弃废液，将吸附板重新放回同一深孔板中。
5．重复操作步骤4。
6．3,600rpm（～2,130×g)离心10min，目的是将吸附板中残余的漂洗液去除。
  注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
7．将96孔吸附板CB2置于一个新的96孔深孔板中，向吸附板各孔膜的中间部位悬空滴加80-100 μl ddH2O（pH≥7.5）或洗脱缓冲液TB，室温放置5 min，3,600rpm （～2,130×g)离心10min收集DNA溶液。
  注意：通常80 μl的洗脱液平均洗脱得到50 μl的DNA产物。为提高得率，可以增加洗脱液体积。此外，若用ddH2O洗脱应保证其pH值在7.0-8.5范围内。

操作步骤：（负压法)
1．正确连接负压装置，将96孔吸附板CB2置于负压装置上；向96孔吸附板CB2每孔中添加200 μl平衡液BL，开启并调节负压，吸尽板中溶液。
2．在PCR、酶切、酶标或测序反应液中，加3倍体积的PB；混合均匀后转移到平衡过的96孔吸附板CB2中，室温放置2 min，开启并调节负压吸尽板中溶液。
3．向96孔吸附板CB2中每孔添加200 μl漂洗液PW，吸尽板中溶液。
4．重复第3步骤。
5．以最大负压将96孔吸附板CB2抽吸10min。
  注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
6．导流管朝下将96孔吸附板CB2于吸水纸上用力拍击6次。
7．将96孔吸附板CB2置于96孔深孔板上，在膜正中央加80-100 μl ddH2O（pH≥7.5）或洗脱缓冲液TB，室温静置5 min。3,600rpm离心10min收集DNA溶液。
8．在该96孔深孔板上覆盖一张新的封口膜，DNA溶液保存于-20℃备用。

DNA浓度及纯度检测：
1．DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2．DNA应在OD₂₆₀处有显著吸收峰，OD₂₆₀值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3．OD₂₆₀/OD₂₈₀比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用ddH2O，比值会偏低，但并不表示纯度低，因为pH值和离子存在会影响光吸收值。

我公司销售的高通量96孔板DNA产物纯化回收试剂盒北京现货，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。