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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
996
- 英文名:
Marine Animal DNA Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温(15~30℃)
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括水产动物基因组提取试剂盒厂家在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:水产动物基因组提取试剂盒厂家
编号:WE0182
品牌:百奥莱博
规格:50次
英文名:Marine Animal DNA Extraction Kit
本试剂盒适合于从多种水产动物(如鱼类、虾类、贝类等)组织中提取总DNA。纯化过程不需*酚或*仿等有机溶剂,无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅胶质离心吸附柱上,其他污染物可流过膜,蛋白、PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步有效的洗涤步骤被有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GTL后加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
不同水产动物组织提取得率:
| 样本 | 建议孵育时间 | DNA得率 |
| 贝类组织 | 0.5 h | 12-20μg |
| 虾组织 | 1 h | 8-14μg |
| 鱼组织 | 1 h | 15-40μg |
操作步骤:
1、取不超过30 mg组织材料,液氮充分研磨后,放入离心管(自备)中,加入200μl Buffer GTL,涡旋振荡15秒。
注意:
1)根据提取的组织不同,起始量也有不同,腮的细胞量较大,一般建议提取量不超过20 mg。
2)如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
2、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋混匀,简短离心,使管壁上的溶液收集到管底。56℃孵育,直至组织完全溶解,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:不同组织裂解时间不同,通常需0.5-2小时即可完成。对于难裂解组织可以适当延长孵育时间。
3、加入200μl Buffer GL,充分颠倒混匀,70℃孵育10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入Buffer GL时可能会产生白色沉淀,一般70℃放置时会消失,不会影响后续实验。如溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4、加入200μl无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能出现絮状沉淀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
5、将步骤4所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
想要了解更多关于水产动物基因组提取试剂盒厂家的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·DH5α感受态细胞
编号:WE0252
英文名称:DH5α Competent Cell
规格:100μl×10支
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测,转化效率可达108,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
产品组成:
| 组份 | 0.1ml×10支 |
| DH5α Competent Cell | 10×100μl |
| Control DNA pUC19,0.1ng/μl | 10μl |
实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA,供对照试验使用。
使用方法:
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,
倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意:
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
储存条件:-80℃。
水产动物基因组提取试剂盒厂家关键词:WE0182,Marine Animal DNA Extraction Kit,水产动物基因组提取试剂盒
·HRP标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号:WE0372
英文名称:Donkey Anti-Goat IgG, Peroxidase Conjugated
规格:100μl
本产品为过氧化物酶标记的经亲和纯化的驴抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,可用于Western Blot、ELISA 和免疫组化检测。酶标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂,具有特异、敏感和安全的特点。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB ECL发光检测(1:10000-200000)
WB 显色检测(1:5000-100000)
ELISA(1:5000-100000)
Immunohisto/Cytochemistry(1:500-5000)
水产动物基因组提取试剂盒厂家关键词:WE0182,Marine Animal DNA Extraction Kit,水产动物基因组提取试剂盒
F030837 BIOTIN标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*BIOTIN
ARB14056 猴透明质酸(HA)酶标法分析 Monkey hyaluronic acid,ha ELISA KIT
ARB13517 鱼类皮质醇(CortIsol)ELISA代测服务 Fish cortisol ELISA KIT
ARB12698 大鼠糖化血红蛋白A1c 酶联免疫定量检测 Rat glycated hemoglobin a1c ELISA KIT
F030806 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a*BIOTIN
9014-01-1 碱性蛋白酶(1:200000)
ARB11396 人神经肽B(NKB)代做ELISA实验 Human neurokinins b,nkb ELISA KIT
BTN111105 MTT检测试剂盒 MTT Assay Kit
PY01-184 紫脲酸铵 ind 25克
ARB13100 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)酶联免疫定量检测 Mouse bone morphogenetic protein 4,bmp-4 ELISA KIT
ARB10300 人不透光相关蛋白(OPAs)elisa检测说明书 Human opacity-associated proteins,opas ELISA KIT
ARB13141 小鼠总补体(CH50)elisa检测操作说明书 Mouse 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购水产动物基因组提取试剂盒厂家。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP322 口腔拭子基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 口拭子2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),2 ml离心管3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机注意:为了保证样本不被食物或者饮料污染,取样前 30 min内请勿进食和饮水。实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,实验准备-试剂盒准备1:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2:准备实验时,将缓冲
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