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- YDH102-01
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温
- 保质期：
12 个月
- 英文名：
quick Midi Purification Kit
- 库存：
500
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100次
quick Midi Purification Kit
保存条件：本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。
产品介绍：
在高离序盐存在的情况下，DNA 片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后低盐、高 pH 值的洗脱缓冲液将纯净 DNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
- 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
- 使用了优质结合液，不含传统结合液的碘化那钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
- 结合液调制成为了黄颜色，便于监测 pH 值变化从而达到最理想结合效果，大大提高回收效率。
- 简单快速、使用方便。
- 注意事项:
- 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复
- 储存于低温（4℃或者-20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- 结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
- 回收纯化的 DNA 片段一般在 100bp 到 40kb 之间，过长、过短片段的回收效率迅速降低。
- 回收 DNA 的量和起始 DNA 的量，洗脱体积，DNA 片断大小有关。一般 1-20μg， 100bp-5kb 的DNA 片段，回收率可达 95%。
- pH 值≤7.5 时，吸附膜吸附 DNA 的效率zui高。如果待纯化产物含有碱性物质过多，造成和结合液混和后pH 偏高，会导致回收率降低。混和后，如果结合液依旧保持黄色，说明 pH 正常；如果变成橘红色或者淡紫色，说明 pH 偏高，可加 5-10μl 3M 醋酸钠
- 洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保 pH 大于 7.5pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA 片段应该保存在-20℃。DNA 片段如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是 EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
提示：第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
- 每 100μl PCR 扩增后体系或者酶切后体系加入 500μl 结合液 BB，充分混匀。（如果初始体系小于 100μl，请事先用双蒸水调整至
- 将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中（吸附柱放入收集管中），室温放置 1min，12,000rpm 离心 30-60sec，倒掉收集管中的废液。
- 加入 500μl 漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心 30sec，弃掉废液。
- 重复操作步骤 3。
- 将吸附柱 EC 放回空收集管中，12,000rpm 离心 2min，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
- 取出吸附柱 EC，放入一个干净的离心管中，室温放置数分钟。
- 在吸附膜的中间部位滴加洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热效果更好），室温放置 2min，12,000rpm 离心
DNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于 30μl，体积过小降 DNA 洗脱效率，减少产量。)
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文献和实验江janice 求助：用的是天根 的胶回收试剂盒，11管PCR产物，差不多500微升的总体积，上四个孔电泳，电泳后用天根的盒子回收到四个EP管，每管40微升，取5微升电泳，居然没有成功，又取10微升电泳还是没有任何条带，不知道可否有人用天根的盒子，是否遇到这方面的问题，一般100微升的PCR产物，回收到多少体积比较恰当，纠结啊，回收了好几次电泳都没有目的条带，盒子是刚买的新盒子，谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
Promega Wizard SV Gel and PCR Clean-up System 品牌：Promega回收范围：100bp-10kb价格：（50次包装的试剂盒报价为562元，11元/次）Promega的产品在进口品牌中一向以价格可亲而著称。这个胶回收试剂盒也不例外。并且这个试剂盒的性能参数好得令人刮目相看！首先是100bp—10kb的回收率高达80%—95%（用于PCR产物回收时适用于100bp—3.2kb的片断）；然后是每个柱子的载量高达40ug！低至10ng。可以容纳更多
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